Luận án Nghiên cứu bào chế và đánh giá tác dụng kháng ung thư của viên nén nổi chứa curcumin

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ 
ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH 
HUỲNH THỊ MỸ DUYÊN 
NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ VÀ ĐÁNH GIÁ TÁC DỤNG 
KHÁNG UNG THƯ CỦA VIÊN NÉN NỔI CHỨA 
CURCUMIN 
LUẬN ÁN TIẾN SĨ DƯỢC HỌC 
Thành phố Hồ Chí Minh-Năm 2017 
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ 
ĐẠI HỌC Y DƯỢC THÀNH PHỐ HỒ CHÍ MINH 
HUỲNH THỊ MỸ DUYÊN 
NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ VÀ ĐÁNH GIÁ TÁC DỤNG 
KHÁNG UNG THƯ CỦA VIÊN NÉN NỔI CHỨA 
CURCUMIN 
 Chuyên ngành: Công nghệ dược phẩm và bào chế thuốc 
 Mã số: 62720402 
LUẬN ÁN TIẾN SĨ DƯỢC HỌC 
 Người hướng dẫn khoa học: 
1. PGS. TS. HUỲNH VĂN HÓA 
2. PGS. TS. VĨNH ĐỊNH 
Thành phố Hồ Chí Minh-Năm 2017 
i 
LỜI CAM ĐOAN 
Tôi xin cam đoan đây là công trình nghiên cứu của riêng tôi. Các số liệu, kết 
quả nêu trong luận văn là trung thực và chưa được công bố trong bất cứ công trình 
nghiên cứu nào khác. 
 Tp. Hồ Chí Minh, ngày tháng năm 2017 
 Tác giả 
 Huỳnh Thị Mỹ Duyên 
ii 
MỤC LỤC 
Trang 
Trang phụ bìa 
Lời cam đoan ............................................................................................................. i 
Mục lục ...................................................................................................................... ii 
Danh mục các ký hiệu, các chữ viết tắt ................................................................. iv 
Danh mục các bảng ................................................................................................. vi 
Danh mục các hình .................................................................................................. ix 
Danh mục các biểu đồ ............................................................................................. xi 
ĐẶT VẤN ĐỀ ............................................................................................................ 1 
CHƯƠNG 1. TỔNG QUAN TÀI LIỆU .................................................................. 3 
1.1. TỔNG QUAN VỀ CURCUMIN ...................................................................... 3 
1.2. TỔNG QUAN VỀ THẨM ĐỊNH QUY TRÌNH PHÂN TÍCH-ĐỘ ỔN ĐỊNH 
VÀ TUỔI THỌ CỦA THUỐC................................................................................ 5 
1.3. TỔNG QUAN VỀ PHƯƠNG PHÁP ĐIỀU CHẾ HỆ PHÂN TÁN RẮN 
(HPTR) ĐỂ CẢI THIỆN ĐỘ HÒA TAN CỦA CURCUMIN ............................... 9 
1.4. TỔNG QUAN VỀ DẠNG THUỐC NỔI TRONG DẠ DÀY ....................... 15 
1.5. TỔNG QUAN VỀ UNG THƯ DẠ DÀY-CÁC PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN 
CỨU ĐỘC TÍNH TẾ BÀO VÀ MÔ HÌNH GÂY UNG THƯ DẠ DÀY TRÊN 
CHUỘT NHẮT TRẮNG ....................................................................................... 20 
CHƯƠNG 2. VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU ....................... 31 
2.1. VẬT LIỆU ...................................................................................................... 31 
2.2. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU .................................................................. 34 
CHƯƠNG 3. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU .............................................................. 59 
3.1. XÂY DỰNG VÀ THẨM ĐỊNH QUI TRÌNH ĐỊNH LƯỢNG CURCUMIN 
TRONG HPTR BẰNG PHƯƠNG PHÁP QUANG PHỔ UV-Vis VÀ TRONG 
VIÊN NÉN NỔI BẰNG PHƯƠNG PHÁP HPLC ................................................ 59 
3.2. NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ HPTR CHỨA CURCUMIN CÓ ĐỘ HÒA TAN 
CAO BẰNG CÁC PHƯƠNG PHÁP VÀ CHẤT MANG KHÁC NHAU ........... 69 
iii 
3.3. NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ VIÊN NÉN NỔI CHỨA HỆ PHÂN TÁN RẮN 
CURCUMIN 100 MG ........................................................................................... 78 
3.4. ĐÁNH GIÁ TÁC DỤNG KHÁNG UNG THƯ DẠ DÀY CỦA THÀNH 
PHẦN CÔNG THỨC VIÊN NÉN NỔI CHỨA HPTR CURCUMIN 100 MG 
TRÊN DÒNG TẾ BÀO UNG THƯ Ở NGƯỜI (IN VITRO) VÀ TRÊN CHUỘT 
NHẮT TRẮNG (IN VIVO) .................................................................................... 92 
CHƯƠNG 4. BÀN LUẬN .....................................................................................100 
4.1. XÂY DỰNG VÀ THẨM ĐỊNH QUI TRÌNH ĐỊNH LƯỢNG CURCUMIN 
TRONG HPTR BẰNG PHƯƠNG PHÁP QUANG PHỔ UV-Vis VÀ TRONG 
VIÊN NÉN NỔI BẰNG PHƯƠNG PHÁP HPLC ..............................................100 
4.2. NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ HỆ PHÂN TÁN RẮN CHỨA CURCUMIN CÓ 
ĐỘ HÒA TAN CAO BẰNG CÁC PHƯƠNG PHÁP VÀ CHẤT MANG KHÁC 
NHAU ..................................................................................................................105 
4.3. NGHIÊN CỨU BÀO CHẾ VIÊN NÉN NỔI CHỨA HỆ PHÂN TÁN RẮN 
CURCUMIN 100 MG .........................................................................................110 
4.4. ĐÁNH GIÁ TÁC DỤNG KHÁNG UNG THƯ DẠ DÀY CỦA THÀNH 
PHẦN CÔNG THỨC VIÊN NÉN NỔI CHỨA HPTR CURCUMIN 100 MG 
TRÊN DÒNG TẾ BÀO UNG THƯ Ở NGƯỜI (IN VITRO) VÀ TRÊN CHUỘT 
NHẮT TRẮNG (IN VIVO) ..................................................................................117 
KẾT LUẬN ............................................................................................................125 
KIẾN NGHỊ ...........................................................................................................127 
DANH MỤC CÁC CÔNG TRÌNH LIÊN QUAN ĐẾN LUẬN ÁN 
TÀI LIỆU THAM KHẢO 
PHỤ LỤC 
iv 
DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CÁC CHỮ VIẾT TẮT 
Stt Chữ 
viết tắt 
Nghĩa tiếng Anh Nghĩa tiếng Việt 
1 5-FU 5-fluorouracil 
2 ACN Acetonitril 
3 ASEAN Association of Southeast Asian 
Nations 
Hiệp hội các quốc gia 
Đông Nam Á 
4 B(a)P Benzo(a)pyren 
5 CD Cyclodextrin 
6 Cur Curcumin 
7 DAD Diode array detector Đầu dò dãy diod quang 
8 DM Phương pháp dung môi 
9 DMBA 7,12 dimethyl benzanthracene 
10 DMSO Dimethyl sulfoxide 
11 DSC Differential Thermal Analysis Phân tích nhiệt vi sai 
12 HPLC High performance liquid 
chromatography 
Sắc ký lỏng hiệu năng cao 
13 HPMC Hydropropyl methylcellulose 
14 HPTR Hệ phân tán rắn 
15 IC50 The half maximal inhibitory 
concentration 
Nồng độ tối thiểu ức chế 
50% sinh vật thử nghiệm 
16 ICH International Conference on 
Harmonization 
Hội nghị quốc tế về hài 
hòa 
17 IR Infrared Hồng ngoại 
18 MeOH Methanol 
19 mtb Khối lượng trung bình 
20 MTT 3-(4,5-dimethyl-thiazol-2-yl)-2,5-
diphenyl tetrazolium bromid) 
21 N Phương pháp nghiền 
v 
Stt Chữ 
viết tắt 
Nghĩa tiếng Anh Nghĩa tiếng Việt 
22 PEG Polyethylenglycol 
23 PVP Polyvinylpyrrolidon 
24 RH Relative humidity Độ ẩm tương đối 
25 RSD Relative Standard Deviation Độ lệch chuẩn tương đối 
26 SD Standard Deviation Độ lệch chuẩn 
27 SEM Scanning Electron Microscopy Kính hiển vi điện tử quét 
28 UTDD Ung thư dạ dày 
29 UV-Vis Ultraviolet-Visible Tử ngoại khả kiến 
30 VL Phương pháp vật lý 
31 VNN Viên nén nổi 
vi 
DANH MỤC CÁC BẢNG 
Trang 
Bảng 1. 1. Một số chế phẩm thuôc nổi trên thị trường ............................................. 20 
Bảng 1. 2. Phân loại mô bệnh học ung thư dạ dày theo Tổ chức Y tế Thế giới năm 
2010 ........................................................................................................................... 21 
Bảng 1. 3. Một số nghiên cứu tác dụng của curcumin trên mô hình gây ung thư 
khác trên chuột .......................................................................................................... 30 
Bảng 2. 1. Các nguyên liệu sử dụng trong bào chế .................................................. 31 
Bảng 2. 2. Các nguyên liệu sử dụng trong phân tích ................................................ 32 
Bảng 2. 3. Các nguyên liệu và động vật sử dụng trong thử in vitro và in vivo ........ 32 
Bảng 2. 4. Các trang thiết bị được sử dụng trong đề tài ........................................... 33 
Bảng 2. 5. Các điều kiện thăm dò ............................................................................. 37 
Bảng 2. 6. Các công thức bào chế HPTR và hỗn hợp trộn vật lý ............................. 41 
Bảng 2. 7. Thành phần công thức cơ bản của viên placebo ..................................... 45 
Bảng 2. 8. Thành phần công thức thăm dò các tá dược tạo khung ........................... 46 
Bảng 2. 9. Điều kiện và tần số thử nghiệm trong nghiên cứu độ ổn định ................ 50 
Bảng 2. 10. Các chỉ tiêu đánh giá, mức chất lượng và số lượng viên nén nổi 
curcumin 100 mg dùng trong nghiên cứu độ ổn định ............................................... 51 
Bảng 2. 11. Nồng độ thử nghiệm .............................................................................. 54 
Bảng 3. 1. Sai lệch độ hấp thu của các hệ tá dược so với mẫu giả định ................... 59 
Bảng 3. 2. Sự tuyến tính giữa độ hấp thu theo nồng định lượng .............................. 61 
Bảng 3. 3. Kết quả khảo sát độ chính xác của phương pháp định lượng HPTR 
curcumin với hệ chất mang PVP K30+Tween 80 ..................................................... 62 
Bảng 3. 4. Kết quả thử độ đúng phương pháp định lượng HPTR curcumin ............ 62 
Bảng 3. 5. Giá trị trung bình các thông số sắc ký của mẫu chuẩn curcumin ở các 
pha động khảo sát (n=6) ............................................................................................ 63 
vii 
Bảng 3. 6. Tính tương thích hệ thống trên mẫu chuẩn curcumin ............................. 64 
Bảng 3. 7. Tính tương thích hệ thống trên mẫu thử viên nén nổi chứa HPTR 
curcumin .................................................................................................................... 64 
Bảng 3. 8. Kết quả khảo sát tính tuyến tính .............................................................. 66 
Bảng 3. 9. Kết quả khảo sát độ đúng ........................................................................ 67 
Bảng 3. 10. Khảo sát độ lặp lại của phương pháp .................................................... 68 
Bảng 3. 11. Kết quả khảo sát độ chính xác trung gian ............................................. 68 
Bảng 3. 12. Độ hoà tan của curcumin nguyên liệu ................................................... 69 
Bảng 3. 13. Độ hoà tan của HPTR curcumin với hệ β-CD và Tween 80 ................. 70 
Bảng 3. 14. Độ hoà tan của HPTR curcumin với hệ β-CD và PVP K30 ................. 70 
Bảng 3. 15. Độ hoà tan của HPTR curcumin với hệ PEG 6000/PVP K30 (10:90) . 71 
Bảng 3. 16. Độ hoà tan của HPTR curcumin với hệ PEG 6000/PVP K30 (25:75) . 71 
Bảng 3. 17. Độ hoà tan của HPTR curcumin với hệ PEG 6000/HPMC 606 (15:85)
 ................................................................................................................................... 72 
Bảng 3. 18. Độ hoà tan của HPTR curcumin với hệ PVP K30 và Tween 80 .......... 72 
Bảng 3. 19. Độ hoà tan của curcumin từ các HPTR với các hệ chất mang .............. 73 
Bảng 3. 20. So sánh độ hoà tan giữa các cặp ............................................................ 74 
Bảng 3. 21. Độ lặp lại quá trình hoà tan của HPTR curcumin với hệ chất mang PVP 
K30 và Tween 80 bào chế bằng phương pháp nghiền ướt-công thức 1 ................... 74 
Bảng 3. 22. Kết quả khảo sát hàm lượng tá dược dính ............................................. 79 
Bảng 3. 23. Kết quả khảo sát tỉ lệ dung môi xát hạt ................................................. 79 
Bảng 3. 24. Kết quả ảnh hưởng của loại tá dược tạo khí đến khả năng nổi của viên
 ................................................................................................................................... 80 
Bảng 3. 25. Kết quả đánh giá khả năng nổi của viên khi thay đổi tỉ lệ NaHCO3 và 
acid citric ................................................................................................................... 80 
Bảng 3. 26. Kết quả đánh giá sử dụng gôm xanthan đến khả năng nổi của viên .... 81 
Bảng 3. 27. Kết quả đánh giá sử dụng HPMC K4M đến khả năng nổi của viên .... 81 
Bảng 3. 28. Kết quả đánh giá sử dụng HPMC K15M đến khả năng nổi của viên .. 82 
viii 
Bảng 3. 29. Kết quả đánh giá sử dụng HPMC 615 đến khả năng nổi của viên ...... 82 
Bảng 3. 30. Kết quả đánh giá khả năng nổi của viên khi phối hợp polyme ............. 83 
Bảng 3. 31. Kết quả ảnh hưởng của độ cứng đến khả năng nổi của viên ................. 84 
Bảng 3. 32. Mô hình công thức được xây dựng bởi phần mềm Design-Expert ....... 85 
Bảng 3. 33. Kết quả thực nghiệm ............................................................................. 85 
Bảng 3. 34. Thành phần công thức tối ưu ................................................................. 86 
Bảng 3. 35. Kết quả thực nghiệm 3 lô kiểm chứng và kết quả dự đoán ................... 86 
Bảng 3. 36. Độ hòa tan từ viên nén nổi chứa HPTR curcumin:PVP:Tween (1:4: 
0,22) và viên nén nổi chứa curcumin nguyên liệu .................................................... 87 
Bảng 3. 37. Kết quả kiểm nghiệm 03 lô ................................................................... 88 
Bảng 3. 38. Kết quả thử nghiệm độ ổn định của 3 lô ở điều kiện lão hóa cấp tốc tại 
thời điểm 6 tháng ....................................................................................................... 90 
Bảng 3. 39. Kết quả thử nghiệm độ ổn định của 3 lô ở điều kiện thử nghiệm dài hạn 
tại thời điểm 24 tháng................................................................................................ 91 
Bảng 3. 40. Tác dụng của các mẫu thử lên tỷ lệ sống của tế bào ung thư dạ dày N87
 ................................................................................................................................... 92 
Bảng 3. 41. Tỷ lệ % ức chế phát triển tế bào ung thư của các mẫu thử ................... 93 
Bảng 3. 42. Phương trình hồi quy và giá trị IC50 của các mẫu thử ........................... 93 
Bảng 3. 43. Số chuột chết ở các lô thử nghiệm ............................................................ 95 
Bảng 3. 44. Tỷ lệ chuột mang u ngoài da ở các lô từ tuần 5 đến tuần 24 ................ 96 
Bảng 3. 45. Chỉ số mỡ của chuột ở các lô từ tuần 5 đến tuần 24 ............................. 97 
Bảng 3. 46. So sánh kết quả đại thể giữa các lô từ tuần 5 đến tuần 24 ............................... 97 
Bảng 3. 47. So sánh kết quả vi thể ở các lô ở tuần 5 đến tuần 24 ............................ 99 
ix 
DANH MỤC CÁC HÌNH 
Trang 
Hình 1. 1. Cấu trúc của curcumin ............................................................................... 3 
Hình 1. 2. Quá trình hình thành và di căn khối u và tác động của curcumin ............. 4 
Hình 2. 1. Sơ đồ tóm tắt quy trình bào chế viên nén nổi lô 2000 viên ..................... 48 
Hình 3. 1. Phổ UV-Vis của mẫu chuẩn curcumin, mẫu thử HPTR curcumin/(PVP 
K30 + Tween 80) và hệ tá dược PVP K30 + Tween 80 trong đệm pH 1,2 .............. 60 
Hình 3. 2. Phổ UV-Vis của mẫu chuẩn curcumin có sử dụng methanol trong giai 
đoạn đầu xử lý mẫu, mẫu trắng đệm pH 1,2 và mẫu trắng methanol ....................... 60 
Hình 3. 3. Sắc ký đồ curcumin chuẩn ở điều kiện 6 ................................................. 63 
Hình 3. 4. Phổ sắc ký đồ dung môi pha mẫu MeOH (1), pha động (2), mẫu trắng 
(3), mẫu chuẩn (4), mẫu thử (5) và mẫu thử thêm chuẩn (6) ........................ ... ó chứa 200 mL môi trường đệm 
pH 1,2 (pha tương tự mục 2.6). Viên phải duy trì tính nguyên vẹn trong suốt quá 
trình nổi. Đánh giá theo 3 mức: tốt (viên không bị vỡ); khá (viên bị vỡ một phần); 
kém (viên bị vỡ hoàn toàn) (quan sát 6 viên ở mục 2.7). 
3. ĐÓNG GÓI-BẢO QUẢN 
- Đóng gói trong bao bì khô, sạch, kín. 
- Bảo quản nơi khô mát nhiệt độ không quá 30 C, tránh ánh sáng. 
Cần Thơ, ngày 14 tháng 4 năm 2017 
PL-25 
PL-5. 5. Phiếu kết quả kiểm nghiệm viên nén nổi curcumin 100 mg 
PL-26 
PL-5. 6. Hình ảnh viên nổi chứa HPTR curcumin 100 mg 
PL-5. 7. Hình ảnh thử tiềm thời nổi của viên 
PL-5. 8. Hình ảnh so sánh viên trước và sau khi nổi 8 giờ 
Viên khi vừa tiếp xúc với 
dung dịch đệm pH 1,2 
Viên bắt đầu nổi lên 
Viên sau khi nổi lên 
hoàn toàn 
PL-27 
PL-5. 9. Hình ảnh X quang của viên đối chiếu 
PL-5. 10. Khảo sát độ ổn định của viên nén nổi curcumin 
Kết quả thử nghiệm độ ổn định của lô 1 ở điều kiện lão hóa cấp tốc 
Chỉ tiêu 
Hình 
thức 
viên 
Độ nổi 
Định 
lượng 
(%) 
Độ 
cứng 
TB 
(N) 
Độ hòa 
tan sau 4 
giờ (%) 
Thời 
điểm 
(tháng) 
0 Đạt 
Đạt (33 giây, > 8 
giờ, nguyên vẹn) 
101,92 55,1 34,01 
1 Đạt 
Đạt (45 giây, > 8 
giờ, nguyên vẹn) 
99,78 49,3 35,25 
2 Đạt 
Đạt (43 giây, > 8 
giờ, nguyên vẹn) 
98,17 44,4 33,69 
3 Đạt 
Đạt (16 giây, > 8 
giờ, nguyên vẹn) 
96,65 47,7 33,82 
4 Đạt 
Đạt (13 giây, > 8 
giờ, nguyên vẹn) 
94,78 45,8 33,48 
5 Đạt 
Đạt (12 giây, > 8 
giờ, nguyên vẹn) 
93,05 43,9 33,92 
6 Đạt 
Đạt (36 giây, > 8 
giờ, nguyên vẹn) 
91,23 47,8 31,17 
(a): Ngay sau khi uống thuốc; (b): 30 phút sau; (c): 1h30 phút sau 
(a) (b) (c) 
PL-28 
Kết quả thử nghiệm độ ổn định của lô 2 ở điều kiện lão hóa cấp tốc 
Chỉ tiêu 
Hình 
thức 
viên 
Độ nổi 
Định 
lượng 
(%) 
Độ 
cứng 
TB 
(N) 
Độ hòa 
tan sau 4 
giờ (mg) 
Thời 
điểm 
(tháng) 
0 Đạt 
Đạt (36 giây, > 8 
giờ, nguyên vẹn) 
100,70 49,5 33,62 
1 Đạt 
Đạt (45 giây, > 8 
giờ, nguyên vẹn) 
99,11 53,3 33,19 
2 Đạt 
Đạt (40 giây, > 8 
giờ, nguyên vẹn) 
97,37 46,4 33,05 
3 Đạt 
Đạt (26 giây, > 8 
giờ, nguyên vẹn) 
95,50 45,5 32,84 
4 Đạt 
Đạt (18 giây, > 8 
giờ, nguyên vẹn) 
93,95 44,7 32,22 
5 Đạt 
Đạt (16 giây, > 8 
giờ, nguyên vẹn) 
92,75 42,9 32,12 
6 Đạt 
Đạt (31 giây, > 8 
giờ, nguyên vẹn) 
91,29 45,9 32,54 
Kết quả thử nghiệm độ ổn định của lô 3 ở điều kiện lão hóa cấp tốc 
Chỉ tiêu 
Hình 
thức 
viên 
Độ nổi 
Định 
lượng 
(%) 
Độ 
cứng 
TB 
(N) 
Độ hòa 
tan sau 4 
giờ (mg) 
Thời 
điểm 
(tháng) 
0 Đạt 
Đạt (34 giây, > 8 
giờ, nguyên vẹn) 
101,03 59,9 34,55 
1 Đạt 
Đạt (45 giây, > 8 
giờ, nguyên vẹn) 
99,24 59,3 33,67 
2 Đạt 
Đạt (40 giây, > 8 
giờ, nguyên vẹn) 
97,62 49,9 33,95 
3 Đạt 
Đạt (26 giây, > 8 
giờ, nguyên vẹn) 
96,22 47,5 32,24 
4 Đạt 
Đạt (18 giây, > 8 
giờ, nguyên vẹn) 
93,99 44,9 31,89 
5 Đạt 
Đạt (16 giây, > 8 
giờ, nguyên vẹn) 
92,92 43,2 31,12 
6 Đạt 
Đạt (42 giây, > 8 
giờ, nguyên vẹn) 
90,59 50,2 32,76 
PL-29 
Kết quả thử nghiệm độ ổn định của lô 1 ở điều kiện thử nghiệm dài hạn 
Chỉ tiêu 
Hình 
thức 
viên 
Độ nổi 
Định 
lượng 
(%) 
Độ 
cứng 
TB 
(N) 
Độ hòa 
tan sau 4 
giờ (mg) 
Thời 
điểm 
(tháng) 
0 Đạt 
Đạt (33 giây, > 8 
giờ, nguyên vẹn) 
101,92 55,1 34,01 
3 Đạt 
Đạt (43 giây, > 8 
giờ, nguyên vẹn) 
98,97 53,7 34,85 
6 Đạt 
Đạt (27 giây, > 8 
giờ, nguyên vẹn) 
97,34 52,5 33,26 
9 Đạt 
Đạt (11 giây, > 8 
giờ, nguyên vẹn) 
96,18 49,5 33,08 
12 Đạt 
Đạt (04 giây, > 8 
giờ, nguyên vẹn) 
95,55 45,9 32,91 
 18 Đạt 
Đạt (14 giây, > 8 
giờ, nguyên vẹn) 
92,25 47,6 32,17 
 24 Đạt 
Đạt (29 giây, > 8 
giờ, nguyên vẹn) 
91,04 52,6 32,07 
Kết quả thử nghiệm độ ổn định của lô 2 ở điều kiện thử nghiệm dài hạn 
Chỉ tiêu 
Hình 
thức 
viên 
Độ nổi 
Định 
lượng 
(%) 
Độ 
cứng 
TB 
(N) 
Độ hòa 
tan sau 4 
giờ (%) 
Thời 
điểm 
(tháng) 
0 Đạt 
Đạt (36 giây, > 8 
giờ, nguyên vẹn) 
100,70 49,5 33,62 
3 Đạt 
Đạt (21 giây, > 8 
giờ, nguyên vẹn) 
98,86 53,7 33,65 
6 Đạt 
Đạt (18 giây, > 8 
giờ, nguyên vẹn) 
97,11 52,5 34,06 
9 Đạt 
Đạt (11 giây, > 8 
giờ, nguyên vẹn) 
96,45 49,5 32,98 
12 Đạt 
Đạt (08 giây, > 8 
giờ, nguyên vẹn) 
94,65 45,9 33,21 
 18 Đạt 
Đạt (12 giây, > 8 
giờ, nguyên vẹn) 
92,37 44,7 32,08 
 24 Đạt 
Đạt (32 giây, > 8 
giờ, nguyên vẹn) 
90,81 50,4 31,22 
PL-30 
Kết quả thử nghiệm độ ổn định của lô 3 ở điều kiện thử nghiệm dài hạn 
Chỉ tiêu 
Hình 
thức 
viên 
Độ nổi 
Định 
lượng 
(%) 
Độ 
cứng 
TB 
(N) 
Độ hòa 
tan sau 4 
giờ (mg) 
Thời 
điểm 
(tháng) 
0 Đạt 
Đạt (34 giây, > 8 
giờ, nguyên vẹn) 
101,03 59,9 34,55 
3 Đạt 
Đạt (37 giây, > 8 
giờ, nguyên vẹn) 
99,00 59,4 33,78 
6 Đạt 
Đạt (31 giây, > 8 
giờ, nguyên vẹn) 
97,89 53,8 33,96 
9 Đạt 
Đạt (18 giây, > 8 
giờ, nguyên vẹn) 
96,51 49,9 33,48 
12 Đạt 
Đạt (10 giây, > 8 
giờ, nguyên vẹn) 
94,75 47,6 34,11 
 18 Đạt 
Đạt (08 giây, > 8 
giờ, nguyên vẹn) 
92,66 51,2 32,93 
 24 Đạt 
Đạt (37 giây, > 8 
giờ, nguyên vẹn) 
91,43 53,2 33,64 
PL-5. 11. Các sắc ký đồ định lượng curcumin ở các lô khảo sát độ ổn định của 
viên nén nổi curcumin 
Kết quả kiểm tra độ tinh khiết pic tạp phân hủy curcumin 
PL-31 
Độ tinh khiết pic curcumin của 
lô 1 tháng 24 thử nghiệm dài hạn 
Độ tinh khiết pic curcumin của 
lô 2 tháng 6 lão hóa cấp tốc 
Kết quả định lượng tháng thứ 6 ở điều kiện lão hóa cấp tốc 
Kết quả định lượng tháng thứ 0 
PL-32 
Kết quả định lượng tháng thứ 3 thử nghiệm dài hạn 
Kết quả định lượng tháng thứ 6 thử nghiệm dài hạn 
Kết quả định lượng tháng thứ 9 thử nghiệm dài hạn 
PL-33 
Kết quả định lượng tháng thứ 12 thử nghiệm dài hạn 
Kết quả định lượng tháng thứ 18 thử nghiệm dài hạn 
Kết quả định lượng tháng thứ 24 thử nghiệm dài hạn 
PL-34 
PHỤ LỤC 6. ĐÁNH GIÁ TÁC DỤNG KHÁNG UNG THƯ DẠ DÀY CỦA 
THÀNH PHẦN CÔNG THỨC VIÊN NÉN NỔI CHỨA HPTR CURCUMIN 
100 MG TRÊN DÒNG TẾ BÀO UNG THƯ Ở NGƯỜI (IN VITRO) VÀ TRÊN 
CHUỘT NHẮT TRẮNG (IN VIVO) 
PL-6.1. Đường tuyến tính trong thử nghiệm in vitro 
y = -0,0008x3 + 0,1579x2 - 1,2375x + 7,2495 
R² = 0,9962 
0
100
200
300
400
500
600
-20 0 20 40 60 80 100
Đường tuyến tính của thành phần công thức viên nén nổi 
Đường tuyến tính của thành phần công thức viên nén nổi + 5-FU 
y = 0,0065x3 - 0,9881x2 + 48,635x - 730,59 
R² = 0,9497 
0
50
100
150
200
250
300
0 20 40 60 80 100
y = 0,0026x3 - 0,3952x2 + 19,452x - 292,19 
R² = 0,9497 
0
20
40
60
80
100
120
0 20 40 60 80 100
PL-35 
PL-6. 2. Kết quả khảo sát độc tính cấp đường uống của mẫu thử 
Bột nghiền từ viên placebo Bột nghiền từ viên nén nổi 
chứa HPTR curcumin 
100 mg 
Chuột thử nghiệm 1 2 3 4 5 6 1 2 3 4 5 6 
Phái ♂ ♂ ♂ ♀ ♀ ♀ ♂ ♂ ♂ ♀ ♀ ♀ 
Trọng lượng (g) 24,1 23,7 24,7 21,7 24,8 22,1 21,3 24,1 23,3 24,8 22,2 21,8 
V cho uống (mL) 0,48 0,48 0,49 0,43 0,50 0,44 0,43 0,48 0,47 0,50 0,44 0,44 
Tổng 
trọng lượng (g) 
138,1 137,5 
Tổng thể tích (mL) 2,82 2,76 
Tổng khối lượng 
mẫu (mg) 
1410 1380 
Liều cho uống 
(mg/kg) 
10210 10036 
Số chuột thử nghiệm 6 6 
Số chuột tử vong 
sau 72 giờ 
0 0 
Số chuột tử vong 
sau 14 ngày 
0 0 
Đường tuyến tính của 5-FU 
y = 0,002x3 - 0,0852x2 - 0,796x + 49,661 
R² = 0,9994 
0
50
100
150
200
250
0 20 40 60 80
PL-36 
PL-6. 3. Khối lượng chuột trung bình ở các lô từ tuần 1 đến tuần 24 
Lô 
Tuần 
1 2 3a 3b 4 5a 5b 6a 6b 
1 33,4±3 34,4±1,1 35,9±1 32,3±1,8 35±1,1 32,3±1,3 32,8±2 33,3±0,8 31,8±2 
2 34,1±3,4 35,3±1 35,8±0,9 32,4±1,4 34,8±1 30,9±1,1 32,6±2,2 33,1±0,8 31,1±1,8 
3 35,3±3,1 34,9±1,1 35±1,4 33,5±1,3 35±1,7 32,3±1,2 32,7±2,3 34,6±1,1 30,9±1,5 
4 36,1±3,4 34,7±1,3 34,4±1,8 33,9±1,2 34,8±1,9 32,9±1,1 32,8±2,8 35,0±1,3 33,2±1,6 
5 39,4±2,9 36,8±2,3 36,2±2,2 35,9±1,9 35,9±1,4 34,2±0,8 34,9±1,6 33,5±1,6 32,5±1,4
*
6 39,7±2,7 31,4±1,7
*
 32,6±2,3
*
 32,4±2
*
 33,3±0,6
*
 31,9±0,8
*
 33±1,6
*
 32,8±1,7
*
 32,7±1,4
*
7 39,6±2,8 31,9±1,3
*
 30,4±2,3
*
 31,6±2
*
 31,5±1,6
*
 31,7±1,9
*
 32,1±1.6
* 
32,7±1,7
*
 33,6±1,3
*
8 39,8±2,8 31,7±1,1
*
 30,5±2,3
*
 32,6±1.9
*
 31,6±0,6
*
 31,3±0,8
*
 33,9±1,6
*
 32,3±1,7
*
 33,9±1,3
*
9 39,9±2,8 31,9±1,1
*
 30,5±2,2
*
 33,5±1,9
*
 31,8±0,8
*
 31,9±1,6
*
 34,2±0,8
*
 32,4±1,6
*
 34,1±1,4
*
10 40,4±2,8 32,5±0,9
*
 30,4±2,2
*
 34,4±2
*
 32,1±0,5
*
 31,9±1,6
*
 34,4±0,9
*
 32,8±1,6
*
 35±1,4
*
11 41,6±2,8 32,8±0,9
*
 34,2±1,8
*
 36,1±1,6
*
 33,9±0,4
*
 32,8±1,6
*
 35,6±0,8
*
 33,8±1,6
*
 36,1±2,1
*
12 43,9±3,2 34,8±1,2
* 
38,1±1,8
*
 39,5±1,5 35.9±1,6
*
 35,2±1,6
*
 39,2±1,1 38±1,3
*
 40,8±2,8 
13 44,8±3,6 36,7±1,2
*
 42,0±1,8 41,3±1,6 36,8±1,8
*
 38,9±1,1
*
 40,9±1,6 40,9±1,1 41,2±2,8 
14 48,1±4,3 39,9±1,3
*
 44,4±1,7 41,4±1,8 38,7±1,9
*
 42,1±1,0
*
 43,9±1,2 43,9±1,8 44,5±3,0 
15 47,8±4,4 37,9±1,2
*
 45,5±1,7 43,2±2,0 39,6±1,8
*
 43,9±1,2 44,6±1,3 43,0±1,8 45,6±3,1 
16 46,7±4,1 38,7±1,4
*
 44,9±1,7 42,7±1,8 40,1±0,9
*
 44,8±1,5 44,2±1,1 44,4±2,2 43,8±4,1 
17 46,7±3,9 39,7±1,4
*
 42,8±1,9 43,4±2,2 41,9±1,0
*
 43,6±1,5 43,4±1,1 43,9±2,4 42,9±4,1 
18 46,6±4,3 39,5±1,3
* 
41,9±1,8 42,9±1,6 39±1,1
* 
42,9±0,8 42,8±1,1 44,8±2,2 42,7±1,4 
19 47,1±4,7 37,2±1,4
* 
42,5±1,9 42,8±2,5 34,5±1,4
* 
43,8±1,1 43,9±1,2 43,9±1,8 43,9±2,7 
20 46,3±3,7 35,2±1,5
* 
42,4±1,9 42,8±3,3 32,1±1,4
* 
42,9±0,9 42,4±1,3 43,6±1,7 45,6±3,2 
21 47,1±4,6 34,6±1,6
* 
43±1,3 42,4±3,2 32,9±1,4
* 
43,1±0,9 43,9±1,1 44,8±1,7 44,8±1,8 
22 45,5±3,8 34,5±0,8
* 
39,8±1,4 42,5±3,2 32,4±1,3
* 
42,7±1 41,9±1,2 43,6±1,4 43,2±1,6 
23 45,7±3,9 34,8±0,7
*
 39,9±1,4 41,7±3,2 34,3±1,6
*
 41,5±1,1 42,7±2,0 39.5±1,4 42,9±2,0 
24 43,5±2,6 37,9±0,9
*
 37,8±1,5 39,8±3,2 37,6±1,8
*
 40,6±1 39,5±2,6 40,5±1,5 41,7±1,7 
* p < 0,05 khi so sánh giữa lô thử và lô sinh lý 
PL-37 
PL-6. 4. Kết quả số khối u dạ dày và kích thước khối u dạ dày ở từng lô từ 
tuần 5 đến tuần 24 
Số khối u 
Kích thước 
khối u phổi 
(mm
3
) 
1 2 3 4 5 6 
Kích thước 
trung bình 
(mm
3
) 
Lô 1 
5 con không có khối u 
Lô 2 
Con 1 2,5 2,5 
Con 2 11,7 10,8 7,8 5,97 3,63 1,25 6,86 
Con 3 6,63 5,91 6,83 7,67 6,76 
Con 4 6,73 7,79 7,29 7,27 
Con 5 5,79 8,62 7,21 
Con 6 9,87 8,61 5,43 7,82 7,92 7,93 
Con 9 2,23 6,89 3,34 4,47 4,22 4,23 
Con 10 2,14 8,72 5,43 
Lô 3a 
Con 2 1,29 1,43 1,36 
Con 3 1,29 1,15 1,22 
Con 4 2,21 2,21 
Con 5 2,35 2,35 
Con 6 Không có khối u 0 
Con 7 1,46 1,09 1,28 
Con 8 1,12 1,12 
Con 9 1,01 1,02 1,78 1,27 
Lô 3b 
Con 1 1,07 1,05 1,06 
Con 3 Không có khối u 0 
Con 4 1,23 0,95 1,09 
Con 5 Không có khối u 0 
Con 6 1,8 1,8 
Con 7 1,23 1,23 
Con 8 1,31 1,31 
Con 9 1,69 1,69 
Con 10 1,16 1,03 0,83 1,01 
PL-38 
Lô 4 
Con 1 7,79 8,93 4,56 5,97 3,27 6,5 6,17 
Con 2 7,31 4,01 7,53 6,28 
Con 4 3,19 5,31 8,63 5,71 
Con 5 7,26 5,57 8,38 6,13 6,86 6,84 
Con 6 7,64 6,87 7,26 
Con 7 Không có khối u 0 
Con 8 4,98 7,73 6,36 
Con 9 6,31 3,79 7,07 5,78 5,74 
Con 10 3,91 4,27 4,09 
Lô 5a 
Con 1 1,65 1,17 1,41 
Con 2 1,79 1,79 
Con 3 Không có khối u 0 
Con 4 Không có khối u 0 
Con 5 0,96 0,96 
Con 6 1,17 1,19 1,18 
Con 7 1,22 1,22 
Con 8 0,16 0,16 
Con 9 Không có khối u 0 
Con 10 1,27 1,19 1,23 
Lô 5b 
Con 1 1,25 0,89 1,07 
Con 3 0,97 0,97 
Con 5 1,15 1,15 
Con 6 1,16 1,16 
Con 7 Không có khối u 0 
Con 8 1,15 0,87 1,01 
Con 9 Không có khối u 0 
Con 10 Không có khối u 0 
Lô 6a 
Con 1 1,02 1,28 1,15 
Con 2 1,27 1,21 1,24 
Con 3 Không có khối u 0 
Con 4 Không có khối u 0 
Con 5 1,13 1,13 
Con 6 1,31 1,31 
PL-39 
Con 7 1,22 1,22 
Con 8 1,10 1,04 1,07 
Con 9 0,56 0,56 
Con 10 0,74 0,74 
Lô 6b 
Con 1 Không có khối u 0 
Con 2 Không có khối u 0 
Con 4 Không có khối u 0 
Con 7 0,67 0,67 
Con 8 1,03 1,03 
Con 9 0,84 0,84 
Con 10 1,39 0,99 1,19 
PL-6. 5. Kết quả phân tích vi thể từ tuần 5 đến tuần 24 
Lô Con 
Tổn thường 
 không ung thư 
Ung thư Bình thường 
1 
1 Bình thường 
2 Bình thường 
3 Bình thường 
4 Bình thường 
5 Bình thường 
2 
1 Ung thư 
2 Ung thư 
3 Ung thư 
4 Viêm mạn 
5 Ung thư 
6 Ung thư 
9 Ung thư 
10 Viêm mạn 
3a 2 Bình thường 
3 Viêm mạn 
4 Bình thường 
5 Ung thư 
6 Bình thường 
7 Ung thư 
8 Ung thư 
9 Bình thường 
PL-40 
3b 
1 Bình thường 
3 Bình thường 
4 Viêm mạn 
5 Bình thường 
6 Ung thư 
7 Ung thư 
8 Bình thường 
9 Bình thường 
10 Ung thư 
4 
1 Ung thư 
2 Ung thư 
4 Ung thư 
5 Ung thư 
6 Ung thư 
7 Bình thường 
8 Viêm mạn 
9 Ung thư 
10 Ung thư 
5a 
1 Ung thư 
2 Bình thường 
3 Bình thường 
4 Bình thường 
5 Viêm mạn 
6 Viêm mạn 
7 Ung thư 
8 Ung thư 
9 Bình thường 
10 Viêm mạn 
5b 
1 Ung thư 
3 Bình thường 
5 Viêm mạn 
6 Bình thường 
7 Bình thường 
8 Viêm mạn 
9 Viêm mạn 
10 Bình thường 
6a 
1 Ung thư 
2 Ung thư 
3 Bình thường 
PL-41 
PL-6. 6. Hình ảnh đại thể đại diện các lô 
Lô 1 Lô 2 
Lô 3a Lô 4 
Lô 5a Lô 6a 
4 Bình thường 
5 Viêm mạn 
6 Bình thường 
7 Ung thư 
8 Viêm mạn 
9 Bình thường 
10 Bình thường 
6b 
1 Bình thường 
2 Bình thường 
4 Bình thường 
7 Viêm mạn 
8 Bình thường 
9 Bình thường 
10 Ung thư 
PL-42 
PL-6. 1. Hình ảnh vi thể từng chuột 
 Lô 2 
Con 1 (ung thư) Con 2 (ung thư) Con 3 (ung thư) Con 4 (viêm mạn) 
CHẾT 
CHẾT 
Con 5 (ung thư) Con 6 (ung thư) Con 7 (chết) Con 8 (chết) 
Con 9 (ung thư) Con 10 (viêm mạn) 
PL-43 
Lô 3a 
CHẾT 
Con 1 (chết) Con 2 (bình thường) Con 3 (viêm mạn) Con 4 (bình thường) 
Con 5 (ung thư) Con 6 (bình thường) Con 7 (ung thư) Con 8 (ung thư) 
CHẾT 
Con 9 (bình thường) Con 10 (chết) 
PL-44 
Lô 3b 
CHẾT 
Con 1 (bình thường) Con 2 (chết) Con 3 (bình thường) 
Con 4 (viêm mạn) 
Con 5 (bình thường) Con 6 (ung thư) 
Con 7 (ung thư) Con 8 (bình thường) 
Con 9 (bình thường) Con 10 (ung thư) 
PL-45 
Lô 4 
CHẾT 
Con 1 (ung thư) 
Con 2 (ung thư) 
Con 3 (chết) 
Con 4 (ung thư) 
Con 5 (ung thư) 
Con 6 (ung thư) 
Con 7 (bình thường) 
Con 8 (viêm mạn) 
Con 9 (ung thư) 
Con 10 (ung thư) 
PL-46 
Lô 5a 
Con 1 (ung thư) Con 2 (bình thường) 
Con 3 (bình thường) 
Con 4 (bình thường) 
Con 5 (viêm mạn) Con 6 (viêm mạn) 
Con 7 (ung thư) Con 8 (ung thư) 
Con 9 (bình thường) Con 10 (viêm mạn) 
PL-47 
Lô 5b 
CHẾT 
CHẾT 
Con 1 (ung thư) Con 2 (chết) 
Con 3 (bình thường) 
Con 4 (chết) 
Con 5 (viêm mạn) Con 6 (bình thường) 
Con 7 (bình thường) Con 8 (viêm mạn) 
Con 9 (viêm mạn) Con 10 (bình thường) 
PL-48 
Lô 6a 
Con 1 (ung thư) Con 2 (ung thư) 
Con 3 (bình thường) 
Con 4 (bình thường) 
Con 5 (viêm mạn) Con 6 (bình thường) 
Con 7 (ung thư) Con 8 (viêm mạn) 
Con 9 (bình thường) Con 10 (bình thường) 
PL-49 
Lô 6b 
CHẾT 
Con 1 (bình thường) Con 2 (bình thường) 
Con 3 (chết) 
Con 4 (bình thường) 
CHẾT 
CHẾT 
Con 5 (chết) Con 6 (chết) 
Con 7 (viêm mạn) Con 8 (bình thường) 
Con 9 (bình thường) Con 10 (ung thư) 
PL-50 
PL-6. 2. Phiếu trả kết quả phân tích vi phẫu chuột