Luận án Nghiên cứu một số đặc điểm của bệnh care ở chó nuôi tại hà nội và chế kháng thể phòng trị bệnh

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM 
¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯ 
NGUYỄN THỊ HUYỀN 
NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM 
CỦA BỆNH CARE Ở CHÓ NUÔI TẠI HÀ NỘI 
VÀ CHẾ KHÁNG THỂ PHÒNG TRỊ BỆNH 
LUẬN ÁN TIẾN SĨ 
NHÀ XUẤT BẢN HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP - 2021
HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM 
¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯ 
NGUYỄN THỊ HUYỀN 
NGHIÊN CỨU MỘT SỐ ĐẶC ĐIỂM 
CỦA BỆNH CARE Ở CHÓ NUÔI TẠI HÀ NỘI 
VÀ CHẾ KHÁNG THỂ PHÒNG TRỊ BỆNH 
Ngành : Bệnh lý học và chữa bệnh vật nuôi 
Mã số : 9 64 01 02 
Người hướng dẫn khoa học: 
1. PGS.TS. Nguyễn Hữu Nam 
2. PGS.TS. Phạm Ngọc Thạch 
HÀ NỘI - 2021 
i 
LỜI CAM ĐOAN 
Tôi xin cam đoan đây là công trình nghiên cứu của tôi, cùng công ty Hanvet. Các 
kết quả nghiên cứu được trình bày trong luận án là trung thực, khách quan và chưa từng 
dùng để bảo vệ lấy bất kỳ học vị nào. 
Tôi xin cam đoan rằng mọi sự giúp đỡ cho việc thực hiện luận án đã được cám ơn, 
các thông tin trích dẫn trong luận án này đều được chỉ rõ nguồn gốc. 
Hà Nội, ngày tháng năm 2021 
Tác giả luận án 
 Nguyễn Thị Huyền 
ii 
LỜI CẢM ƠN 
Trong thời gian học tập, nghiên cứu và hoàn thành luận án, tôi đã nhận được sự 
hướng dẫn, chỉ bảo tận tình của các thầy cô giáo, sự động viên của đồng nghiệp và bạn 
bè; sự giúp đỡ cả về vật chất lẫn tinh thần của cơ quan và gia đình. 
Nhân dịp này, cho phép tôi được bày tỏ lòng kính trọng và biết ơn đến Cha, Mẹ 
người đã sinh thành dưỡng dục tôi. Biết ơn PGS.TS. Nguyễn Hữu Nam, PGS.TS. Phạm 
Ngọc Thạch đã hết lòng hướng dẫn, động viên và giúp đỡ tôi trong suốt quá trình học tập, 
thực hiện và hoàn thành luận án này. 
Xin gửi lời cảm ơn sâu sắc đến Ông Nguyễn Hữu Vũ, Chủ Tịch Hội Đồng Quản 
Trị - Tổng Giám đốc Công ty Cổ phần Dược thú y Hanvet cùng toàn thể Ban Lãnh Đạo 
Công ty, đã giúp đỡ tôi về vật chất, tinh thần và tạo điều kiện cho tôi về thời gian, địa 
điểm nghiên cứu trong suốt quá trình thực hiện đề tài. 
Tôi xin bày tỏ lòng biết ơn chân thành tới Ban Giám đốc Học viện, Ban Quản lý 
đào tạo và Các thầy cô giáo trong Bộ môn Bệnh lý; Các thầy cô giáo trong Khoa Thú y – 
Học viện Nông nghiệp Việt Nam: đã tận tình hướng dẫn chỉ bảo, dành nhiều công sức, 
thời gian và tạo điều kiện cho tôi trong suốt quá trình học tập và thực hiện đề tài. 
Cảm ơn Anh Trần Văn Khánh, PTGĐ Công ty Hanvet; Ban Lãnh đạo Trung tâm 
Nghiên cứu và sinh phẩm công ty Hanvet và đặc biệt là toàn bộ cán bộ nhân viên Bệnh 
viện Thú Cảnh Hanvet: Chị Lê Thị My, anh Lê Phạm Trịnh Công, chị Lê Thị Nụ..... đã 
giúp đỡ hỗ trợ tôi trong suốt quá trình nghiên cứu này. 
Xin gửi lời cảm ơn và lời yêu thương đến đại gia đình tôi: Bố, Mẹ, Chồng và các 
con.., các anh chị em của tôi, người thân, bạn bè, đồng nghiệp đã tạo mọi điều kiện thuận 
lợi và giúp đỡ tôi về mọi mặt, động viên khuyến khích tôi hoàn thành luận án./. 
 Hà Nội, ngày tháng năm 2021 
Nghiên cứu sinh 
Nguyễn Thị Huyền 
iii 
MỤC LỤC 
Lời cam đoan ..................................................................................................................... i 
Lời cảm ơn ........................................................................................................................ ii 
Mục lục ............................................................................................................................ iii 
Danh mục chữ viết tắt ...................................................................................................... vi 
Danh mục bảng ............................................................................................................... vii 
Danh mục hình ................................................................................................................. ix 
Trích yếu luận án .............................................................................................................. x 
Thesis abstract ................................................................................................................. xii 
Phần 1. Mở đầu ............................................................................................................... 1 
1.1. Tính cấp thiết của đề tài ........................................................................................ 1 
1.2. Mục tiêu nghiên cứu ............................................................................................. 2 
1.3. Phạm vi nghiên cứu .............................................................................................. 2 
1.3.1. Đối tượng nghiên cứu ........................................................................................... 2 
1.3.3. Phạm vi nghiên cứu .............................................................................................. 3 
1.4. Những đóng góp mới của đề tài ............................................................................ 3 
1.5. Ý nghĩa khoa học và thực tiễn của đề tài .............................................................. 3 
1.5.1. Ý nghĩa khoa học .................................................................................................. 3 
1.5.2. Ý nghĩa thực tiễn ................................................................................................... 4 
Phần 2. Tổng quan tài liệu ............................................................................................. 5 
2.1. Tình hình nghiên cứu bệnh Care ........................................................................... 5 
2.1.1. Tình hình nghiên cứu bệnh Care trên thế giới ...................................................... 5 
2.1.2. Tình hình nghiên cứu bệnh Care ở Việt Nam ...................................................... 8 
2.2. Đặc tính sinh học của virus gây bệnh Care ......................................................... 10 
2.2.1. Đặc điểm hình thái, cấu trúc, phân loại .............................................................. 10 
2.2.2. Đặc tính sinh học của virus ................................................................................. 13 
2.2.3. Đặc tính sinh học phân tử của virus .................................................................... 15 
2.3. Bệnh Care trên chó ............................................................................................. 18 
2.3.1. Dịch tễ học .......................................................................................................... 18 
2.3.2. Cơ chế sinh bệnh ................................................................................................. 19 
2.3.3. Đặc điểm bệnh lý ................................................................................................ 20 
2.3.4. Chẩn đoán bệnh .................................................................................................. 23 
iv 
2.3.5. Phòng và điều trị bệnh ........................................................................................ 26 
2.4. Một số nghiên cứu về áp dụng điều trị bệnh Care bằng kháng huyết thanh ....... 29 
Phần 3. Nội dung và Phương pháp nghiên cứu .......................................................... 33 
3.1. Nội dung nghiên cứu ........................................................................................... 33 
3.1.1. Nghiên cứu một số đặc điểm bệnh Care ở chó tại Hà Nội.................................. 33 
3.1.2. Nghiên cứu chế tạo kháng thể kháng virus Care ................................................ 33 
3.1.3. Nghiên cứu gây bệnh thực nghiệm và điều trị thử nghiệm bệnh Care bằng 
kháng thể kháng virus Care ................................................................................ 33 
3.2. Vật liệu nghiên cứu ............................................................................................. 33 
3.2.1. Trang thiết bị và dụng cụ .................................................................................... 33 
3.2.2. Phạm vi nghiên cứu ............................................................................................ 34 
3.3. Phương pháp nghiên cứu .................................................................................... 35 
3.3.1. Phương pháp nghiên cứu một số đặc điểm của bệnh Care ................................. 35 
3.3.2. Phương pháp nghiên cứu chế tạo kháng thể kháng virus Care ........................... 38 
3.3.3. Phương pháp gây bệnh thực nghiệm và điều trị thực nghiệm ............................ 42 
3.3.4. Phương pháp điều trị thử nghiệm bằng kháng thể kháng virus Care .................. 45 
3.3.5. Phương pháp xử lý số liệu .................................................................................. 47 
Phần 4. Kết quả và Thảo luận ..................................................................................... 48 
4.1. Kết quả xác định một số đặc điểm của bệnh Care .............................................. 48 
4.1.1. Kết quả xác định tỷ lệ mắc bệnh Care ở chó đến khám tại các phòng khám 
thú y trên địa bàn Hà Nội .................................................................................... 48 
4.1.2. Kết quả kiểm tra chó mắc Care bằng test chẩn đoán nhanh CDV-Ag ................ 49 
4.1.3. Tỷ lệ chó mắc bệnh Care theo địa bàn điều tra ................................................... 52 
4.1.4. Tỷ lệ mắc bệnh Care theo giống chó .................................................................. 53 
4.1.5. Tỷ lệ chó mắc bệnh Care theo lứa tuổi ............................................................... 55 
4.1.6. Tỷ lệ chó mắc bệnh Care theo mùa ..................................................................... 57 
4.1.7. Tỷ lệ chó mắc bệnh Care theo tính biệt .............................................................. 58 
4.1.8. Một số hình ảnh triệu chứng điển hình của chó mắc bệnh Care ......................... 59 
4.1.9. Kết quả nghiên cứu bệnh tích đại thể và vi thể của chó mắc bệnh Care .......... 61 
4.2. Nghiên cứu chế tạo kháng thể kháng virus Care ................................................ 64 
4.2.1. Nghiên cứu quy trình chế tạo kháng thể kháng virus Care ................................. 64 
4.2.2. Chế tạo thử nghiệm kháng thể kháng virus Care quy mô Pilot .......................... 71 
v 
4.3. Kết quả gây bệnh thực nghiệm và điều trị thử nghiệm ....................................... 74 
4.3.1. Kết quả gây bệnh thực nghiệm ........................................................................... 74 
4.3.2. Kết quả nghiên cứu thử nghiệm kháng thể kháng virus Care trong phòng 
và trị bệnh ........................................................................................................... 93 
Phần 5. Kết luận và Kiến nghị ................................................................................... 102 
5.1. Kết luận ............................................................................................................. 102 
5.2. Kiến nghị ........................................................................................................... 103 
Danh mục các công trình đã công bố liên quan đến luận án ........................................ 104 
Tài liệu tham khảo ........................................................................................................ 105 
Phụ lục .......................................................................................................................... 114 
vi 
DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT 
Chữ viết tắt Tiếng anh Nghĩa tiếng việt 
ADN acid nucleic Phân tử polyme chứa thông 
tin di truyền 
ARN Acid Ribonucleic acid Phân tử polyme chứa thông 
tin di truyền 
C Control 
cDNA complementary DNA Chuỗi mạch đơn của ADN 
CDV Cannine Distemper Virus Virus gây bệnh Care ở chó 
CDVag Cannine Distemper Virus antigen kháng nguyên CDV 
CEF chick embryo fibroblasts Tế bào xơ phôi gà 
CPE cytopathogenic effect Bệnh tích tế bào 
DMEM Dulbecco's Modified 
Eagle Medium 
Môi trường nuôi cấy tế bào 
do ông Dulbecco phát triển 
FBS Fetal bovine serum Huyết thanh thai bò 
FCS Fetal calf serum Huyết thanh thai bê 
IgA immunoglobulin A Globlin miễn dịch dòng A 
IgD immunoglobulin D Globlin miễn dịch dòng D 
IgE immunoglobulin E Globlin miễn dịch dòng E 
IgG immunoglobulin G Globlin miễn dịch dòng G 
IgM immunoglobulin M Globlin miễn dịch dòng M 
KKT anti - antibody Kháng kháng thể 
KN Antigen Kháng nguyên 
KT antibody Kháng thể 
T Test 
TCID50 tissue culture infectious dose 50% Liều gây nhiễm 50% tế bào 
Vero-DST 
TCVN 8684-
6:2001. 
Vero Dog Slam Tag 
- 
Tế bào vero gắn 
pCAGdogSlam vào plasmid 
Theo tiêu chuẩn Việt Nam 
8684-6:2001 
vii 
DANH MỤC BẢNG 
TT Tên bảng Trang 
2.1. Các loại vaccine và kháng thể kháng virus Care đang dùng tại Việt Nam......... 31 
4.1. Kết quả xác định tỷ lệ mắc bệnh Care ở chó đến khám tại các phòng khám 
trên địa bàn Hà Nội ............................................................................................. 48 
4.2. Kết quả kiểm tra chó mắc Care bằng test chẩn đoán nhanh CDV Ag ................ 51 
4.3. Tỷ lệ mắc bệnh Care ở chó theo địa bàn điều tra tại Hà Nội .............................. 52 
4.4. Kết quả xác định tỷ lệ mắc bệnh Care theo giống chó ...................................... 53 
4.5. Kết quả xác định tỷ lệ mắc Care theo lứa tuổi ................................................... 55 
4.6. Kết quả xác định tỷ lệ chó mắc bệnh Care theo mùa vụ .................................... 57 
4.7 Kết quả xác định tỷ lệ chó mắc bệnh Care theo tính biệt ................................... 58 
4.8. Kết quả cô đặc huyết thanh bằng hệ thống lọc TFF ........................................... 73 
4.9. Kết quả thử nghiệm chế tạo kháng thể Care quy mô Pilot ................................. 74 
4.10. Kết quả ra chai và kiểm nghiệm 03 lô sản phẩm kháng thể Care ....................... 74 
4.11a. Kết quả xét nghiệm virus Care bằng phương pháp RT - PCR ........................... 75 
4.11b. Kết quả xét nghiệm virus Care bằng phương pháp RT - PCR ........................... 76 
4.12. Biến động thân nhiệt của chó sau khi được gây bệnh với chủng CDV-HV 
và điều trị thực nghiệm bằng chế phẩm kháng huyết thanh Care ....................... 79 
4.13. Biến động tần số hô hấp của chó sau khi được gây bệnh với chủng CDV-
HV và điều trị thực nghiệm bằng chế phẩm kháng huyết thanh Care ................ 81 
4.14. Biến động tần số tim của chó sau khi được gây bệnh với chủng CDV-HV 
và điều trị thực nghiệm bằng chế phẩm kháng huyết thanh Care ...................... 83 
4.15. Triệu chứng lâm sàng của chó gây nhiễm CDV-HV thực nghiệm .................... 85 
4.16. Kết quả khảo sát một số chỉ tiêu huyết học chủ yếu của chó gây bệnh với 
chủng CDV-HV thực nghiệm ............................................................................. 87 
4.17. Bệnh tích vi thể chủ yếu của chó được gây nhiễm CDV-HV thực nghiệm ...... 89 
4.18. Kết quả nhuộm hóa mô miễn dịch của các cơ quan ........................................... 92 
4.19. Kết quả bước đầu điều trị thử nghiệm chó gây nhiễm virus Care ..... ... hu M.S., Husar W., Cook S. D., Dowling P. C. & Udem S. A. (1993). Canine 
distemper terminal and intergenic non-protein coding nucleotide sequences: 
completion of the entire CDV genome sequence. Virology. 193(1): 66-72. 
88. Simon-Martinez J., Ulloa-Arvizu R., Soriano V. & Fajardo R. (2008). Identification 
of a genetic variant of canine distemper virus from clinical cases in two vaccinated 
dogs in Mexico. The Veterinary Journal. 175(3): 423-426. 
113 
89. Sykes J. E. (2013). Canine distemper virus infection. Canine and feline infectious 
diseases. Elsevier, St. Louis, Missouri. 152-165. 
90. Timothy W. Y. (2008). Isolation of wild-type canine distemper viruses from dogs 
in South Africa. Indian journal of virology. indian virological soc ccs haryana 
agricultural univ, dept plant pathology . 116-116. 
91. Watson A. & Wright R. (1974). The ultrastructure of cytoplasmic inclusions in 
circulating lymphocytes in canine distemper. Research in veterinary science. 17(2): 
188-192. 
92. Weiss D. (2010). Iron and copper deficiencies and disorders of iron metabolism. 
Schalm’s Veterinary Hematology. 6th ed. Ames: Wiley-Blackwell. 167-71. 
93. Wills J. & Simpson K.W. (1994). Waltham book of clinical nutrition of the dog and 
cat. Pergamon Press. trang trang. 
94. Wintrobe M.M. (1967). Clinical Hermatology. Lea & Febiger. 
95. Woma T.Y. & Van Vuuren M. (2009). Isolation of canine distemper viruses from domestic 
dogs in South Africa using Vero. DogSLAM cells and its application to diagnosis. 
96. Woodroffe R. & Ginsberg J. R. (1999). Conserving the African wild dog Lycaon 
pictus. I. Diagnosing and treating causes of decline. Oryx. 33(2): 132-142. 
97. Wyllie S., Kelman M. & Ward M. (2016). Epidemiology and clinical presentation 
of canine distemper disease in dogs and ferrets in Australia, 2006–2014. Australian 
veterinary journal. 94(7): 215-222. 
114 
PHỤ LỤC 
Phụ lục 1: Mẫu hồ sơ bệnh án gia súc tại Bệnh Viện Thú Cảnh Hanvet 
BỆNH VIỆN THÚ CẢNH HANVET 
Trụ sở chính - PK1: 86 - 88 Trường Chinh - Đống Đa - Hà Nội Số HS: 
12150 Điện thoại: 024.38687201 - Hotline: 0913.367.270 
Website: hanvetpetclinic.com.vn 
PHIẾU KHÁM BỆNH- HỒ SƠ THỐNG KÊ BỆNH 
I. THÔNG TIN KHÁCH HÀNG 
TÊN: ............................................................................................................................................. 
SỐ ĐIỆN THOẠI: ........................................................................................................................ 
ĐỊA CHỈ: ...................................................................................................................................... 
II. THÔNG TIN THÚ CƯNG 
TÊN: ............................................................................................................................................. 
TUỔI: ........................................................................................................................................... 
MÀU SẮC: ................................................................................................................................... 
VACINE: ...................................................................................................................................... 
GIỐNG: ........................................................................................................................................ 
GIỚI TÍNH: .................................................................................................................................. 
CÂN NĂNG: ................................................................................................................................ 
TẨY KST: .................................................................................................................................... 
THÔNG TIN KHÁC 
 ...................................................................................................................................................... 
 ...................................................................................................................................................... 
 ...................................................................................................................................................... 
(Ghi rõ tên Vaccinee, thuốc tẩy KST và thời gian sử dụng gần nhất) 
III. TRIỆU CHỨNG CẬN LÂM SÀNG 
NHIỆT ĐỘ: .................................................................................................................................. 
NHỊP TIM: ................................................................................................................................... 
HÔ HẤP: ...................................................................................................................................... 
 115 
TRIỆU CHỨNG BẤT THƯỜNG: ..................................................................................... 
 ............................................................................................................................................ 
 ............................................................................................................................................ 
 ............................................................................................................................................ 
CÁC XÉT NGHIỆM KHÁC: ............................................................................................. 
 ............................................................................................................................................ 
 ............................................................................................................................................ 
 ............................................................................................................................................ 
IV. CHẨN ĐOÁN - KẾT LUẬN 
 ............................................................................................................................................ 
 ............................................................................................................................................ 
 ............................................................................................................................................ 
 ............................................................................................................................................ 
V. ĐIỀU TRỊ 
 ............................................................................................................................................ 
 ............................................................................................................................................ 
 ............................................................................................................................................ 
 ............................................................................................................................................ 
VI. CÁC THÔNG BÁO KHÁC 
 ............................................................................................................................................ 
 ............................................................................................................................................ 
 ............................................................................................................................................ 
* PK2: Số 126 Nguyễn Đình Hoàn, Cầu Giấy, Hà Nội - ĐT: 024.37824060 
* PK3: A12 TT 18 Khu ĐT Văn Quán, Hà Đông, Hà Nội - ĐT: 0985.212.174 
* PK 4: Cửa Hàng 86 Đường Trường Chinh, Quận Đống Đa, Hà Nội: 0961.084.774 
*PK5: số 54 Phố Hạ Yên, Phường Yên Hòa, Quân Cầu Giấy: 0961.294.466 
* PK6: 491 Đường Chợ Hàng , Quận Lê Chân, Tp Hải Phòng - ĐT: 022.53272195 
*PK7: Số 440 Đường Lê Lợi, P. Yết Kiêu,Tp Hạ Long - ĐT: 0983.755.094 
 116 
CÔNG TY CỔ PHẦN DƯỢC VÀ VẬT TƯ THÚ Y 
Địa chỉ: 88 Trường Chinh, Đống Đa, Hà Nội 
ĐT: 043.8685996 – FAX: 043.8690097 
CỘNG HÒA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM 
Độc lâp – Tự do – Hạnh phúc 
BỆNH VIỆN THÚ CẢNH HANVET 
Trụ sở chính - PK1: 86 - 88 Trường Chinh - Đống Đa - Hà Nội Số HS: 
12150 Điện thoại: 024.38687201 - Hotline: 0913.367.270 
Website: hanvetpetclinic.com.vn 
BỆNH ÁN 
Hà Nội, Ngày  tháng năm 20 
Số bệnh án:. 
Họ và tên chủ vật nuôi: 
Địa chỉ:...ĐT:............ 
Loại vật nuôi: ... Giống:.. Tuổi:.. Màu lông:.Trọng lượng: 
Loại vaccine đã tiêm phòng: 
Tiền sử bệnh: 
- Thời gian mắc bệnh : 
- Triệu chứng chủ yếu: 
- Thuốc và phương pháp điều trị: 
Kết quả khám bệnh: 
-Thân nhiệt:. 
-Hệ tiết niệu: 
-Hệ tuần hoàn:. -Da, lông: 
-Hệ hô hấp:.. -Niêm mạc: 
-Hệ tiêu hóa: 
Kết quả sơ chẩn: 
Quá trình theo dõi điều trị: 
Ngày: 
CHỦ VẬT NUÔI BÁC SĨ ĐIỀU TRỊ 
 117 
Phụ Lục 2: K ết quả điều tra tỷ lệ mắc bệnh Care ở chó tại khu vực Hà Nội 
Hình 2.1 Tỷ lệ mắc Care theo địa bàn điều tra tại Hà Nội 
Hình 2.2 Tỷ lệ mắc Care theo giống chó 
3.29
6.9
4.04
3.17
1.45
3.15
2.51
1.39
0.59
0
1
2
3
4
5
6
7
8
Quận Tây 
Hồ
Quận 
Đống Đa
Quận Hai 
Bà Trưng
Quận Cầu 
Giấy
Quận Hà 
Đông
Quận 
Thanh 
Xuân
Quận 
Hoàn 
Kiếm
Quận Ba 
Đình
Quận 
Hoàng Mai
T
ỷ
 l
ệ 
(%
)
3.81 3.76
5.72
2.03
3.67
2.98
2.28 2.36
3.49 3.69 3.45
3.22
5.42
1.8
2.06
0
1
2
3
4
5
6
7
P
h
ú
 Q
u
ố
c
B
ắc
 H
à
M
ô
n
g
 c
ộ
c
C
h
ó
 V
àn
g
L
ai
 B
er
g
ie
P
h
ố
c
P
o
m
er
an
ia
n
P
o
o
d
le
D
ac
h
sh
u
n
d
A
la
sk
a
C
o
rg
i
C
h
o
w
ch
o
w
B
er
g
ie
R
o
tt
w
ei
le
r
G
iố
n
g
 c
h
ó
 k
h
ác
Nhóm chó nội Nhóm chó ngoại
T
ỷ
 l
ệ 
(%
)
Tỷ lệ mắc Care theo giống chó
 118 
Hình 2.3. Tỷ lệ mắc Care theo lứa tuổi 
Hình 2.4. Tỷ lệ mắc Care theo mùa vụ 
0
1
2
3
4
5
6
7
8
Chó dưới 2 tháng tuổi Chó từ 2 - 6 tháng tuổi Chó từ 6 - 12 tháng tuổi Chó trên 12 tháng tuổi
T
ỷ
 l
ệ 
(%
)
0
1
2
3
4
5
6
Mùa Xuân Mùa Hè Mùa Thu Mùa Đông
T
ỷ 
lệ
 m
ắc
 (
%
)
 119 
Phụ Lục 3: Kết quả xác định khả năng đáp ứng miễn dịch ở chó 
Ngày 
kiểm 
tra 
Mã số Số mẫu 
Hiệu giá kháng thể Hiệu 
giá 
khán
g thể 
trung 
bình 
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 
Ngày 7 
CTN01 5 3 2 
CTN02 5 1 3 1 
CTN03 5 3 2 
CTN04 5 1 3 1 
CTN05 5 1 2 2 
Trung 
bình 
 3 28 24 0 0 0 0 0 0 0 0 2.2 
Ngày 
14 
CTN01 5 1 1 3 
CTN02 5 2 3 
CTN03 5 1 2 2 
CTN04 5 3 2 
CTN05 5 4 1 
Trung 
bình 
 0 0 0 8 60 66 0 0 0 0 0 5.36 
Ngày 
28 
CTN01 5 1 1 3 
CTN02 5 3 2 
CTN03 5 1 2 2 
CTN04 5 1 3 1 
CTN05 5 4 1 
Trung 
bình 
 0 0 0 0 0 18 91 72 0 0 0 7.24 
Ngày 
42 
CTN01 5 2 3 
CTN02 5 1 3 1 
CTN03 5 2 2 1 
CTN04 5 1 1 3 
CTN05 5 4 1 
Trung 
bình 
 0 0 0 0 0 0 0 32 108 90 0 9.2 
Ngày 
56 
CTN01 5 1 1 3 9.4 
CTN02 5 1 3 1 9 
CTN03 5 2 2 1 8.8 
CTN04 5 1 2 2 9.2 
CTN05 5 4 1 9.2 
Trung 
bình 
 0 0 0 0 0 0 0 40 108 80 0 9.12 
 120 
Phụ Lục 4: Kết quả xác định khả năng đáp ứng miễn dịch ở Thỏ 
Ngày 
kiểm 
tra 
Mã số Số mẫu 
Hiệu giá kháng thể Hiệu 
giá 
khán
g thể 
trung 
bình 
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 
Ngày 7 
CTN01 5 1 3 1 
CTN02 5 3 2 
CTN03 5 2 2 1 
CTN04 5 2 3 0 
CTN05 5 2 2 1 
Trung 
bình 
 10 24 9 0 0 0 0 0 0 0 0 1.72 
Ngày 
14 
CTN01 5 2 1 2 
CTN02 5 3 2 
CTN03 5 1 2 2 
CTN04 5 3 2 
CTN05 5 4 1 
Trung 
bình 
 0 12 36 28 0 0 0 0 0 0 0 3.04 
Ngày 
28 
CTN01 5 1 1 3 
CTN02 5 2 3 
CTN03 5 2 3 
CTN04 5 2 3 
CTN05 5 3 2 
Trung 
bình 
 0 0 0 28 65 30 0 0 0 0 0 4.92 
Ngày 
42 
CTN01 5 1 2 2 
CTN02 5 3 2 
CTN03 5 3 2 
CTN04 5 1 1 3 
CTN05 5 4 1 
Trung 
bình 
 0 0 0 0 10 78 70 0 0 0 0 6.32 
Ngày 
56 
CTN01 5 1 1 3 7.4 
CTN02 5 2 3 7.6 
CTN03 5 2 2 1 6.8 
CTN04 5 1 3 1 7 
CTN05 5 3 2 7.4 
Trung 
bình 
 0 0 0 0 0 24 77 80 0 0 0 7.24 
 121 
Phụ Lục 5: Kết quả xác định độ tuổi của thỏ dùng để chế kháng thể 
Nhóm thí 
nghiệm 
Động vật 
số 
HGKT 
(log2) 
HGKT 
trung bình 
Thỏ 2 tháng 
tuổi 
Thỏ 01 7 
6.4 
Thỏ 02 6 
Thỏ 03 6 
Thỏ 04 6 
Thỏ 05 7 
Thỏ 3 tháng 
tuổi 
Thỏ 06 7 
7.4 
Thỏ 07 7 
Thỏ 08 8 
Thỏ 09 8 
Thỏ 10 7 
Thỏ 4 tháng 
tuổi 
Thỏ 11 7 
7.4 
Thỏ 12 7 
Thỏ 13 8 
Thỏ 14 7 
Thỏ 15 8 
Ngày 0: Tiêm Vaccine Care cho thỏ ở giai đoạn 2, 3 và 4 tháng tuổi 
Ngày 14: Tiêm Vaccine cho thỏ lần 2 
Ngày 28: Tiêm Vaccine cho thỏ lần 3 
Ngày 56: Lấy máu kiểm tra hàm lượng kháng thể 
 122 
Phụ lục 6: Kết quả nghiên cứu quy trình gây tối miễn dịch để sản xuất kháng thể 
Nhóm 
thí 
nghiệm 
Động vật 
số 
98 112 126 
 98 112 126 
Quy 
trình 01 
Thỏ 01 7 7 7 Quy trình 1 7.8 7.6 7.6 
Thỏ 02 8 7 8 Quy trình 2 9.4 9.2 9.2 
Thỏ 03 8 8 8 Quy trình 3 9.4 9.4 9.2 
Thỏ 04 9 9 8 
Thỏ 05 7 7 7 
Trung 
bình 
7.8 7.6 7.6 
Quy 
trình 02 
Thỏ 06 9 8 9 
Thỏ 07 9 9 9 
Thỏ 08 9 9 9 
Thỏ 09 10 10 9 
Thỏ 10 10 10 10 
Trung 
bình 
9.4 9.2 9.2 
Quy 
trình 03 
Thỏ 11 9 8 9 
Thỏ 12 9 9 9 
Thỏ 13 9 10 9 
Thỏ 14 10 10 9 
Thỏ 15 10 10 10 
Trung 
bình 
9.4 9.4 9.2 
Quy trình 01: Tiêm 5 lần vào ngày 0, 14, 28, 42, 56. 
Kiểm tra kháng thể vào ngày 98, 112, 126 
Quy trình 02: Tiêm 6 lần vào ngày 0, 14, 28, 42, 56, 70. 
Kiểm tra kháng thể vào ngày 98, 112, 126 
Quy trình 03: Tiêm 7 lần vào ngày 0, 14, 28, 42, 56, 70, 84. 
Kiểm tra kháng thể vào ngày 98, 112, 126 
 123 
Phụ Lục 7: Kết quả xác định độ tuổi của thỏ dùng để chế kháng thể 
Nhóm thí 
nghiệm 
Động vật 
số 
HGKT 
(log2) 
HGKT 
trung bình 
Thỏ 2 tháng 
tuổi 
Thỏ 01 7 
6.4 
Thỏ 02 6 
Thỏ 03 6 
Thỏ 04 6 
Thỏ 05 7 
Thỏ 3 tháng 
tuổi 
Thỏ 06 7 
7.4 
Thỏ 07 7 
Thỏ 08 8 
Thỏ 09 8 
Thỏ 10 7 
Thỏ 4 tháng 
tuổi 
Thỏ 11 7 
7.4 
Thỏ 12 7 
Thỏ 13 8 
Thỏ 14 7 
Thỏ 15 8 
Ngày 0: Tiêm Vaccine Care cho thỏ ở giai đoạn 2, 3 và 4 tháng tuổi 
Ngày 14: Tiêm Vaccine cho thỏ lần 2 
Ngày 28: Tiêm Vaccine cho thỏ lần 3 
Ngày 56: Lấy máu kiểm tra hàm lượng kháng thể 
 124 
Phụ Lục 8: Kết quả ra chai và kiểm nghiệm 03 lô sản phẩm kháng thể Care 
Lô sản xuất Quy cách (ml/lọ) Số lọ 
Kết quả kiểm nghiệm thành phẩm 
Vô 
trùng 
Thuần 
khiết* 
An 
toàn 
Hiệu 
giá 
KT.Care 01 3 680 Đạt Đạt Đạt 9log2 
KT.Care 02 3 630 Đạt Đạt Đạt 9log2 
KT.Care 03 3 750 Đạt Đạt Đạt 9log2 
Ghi chú: * Kiểm tra sự tạp nhiễm của virus xuất huyết truyền nhiễm thỏ 
Phụ lục 9: Kết quả điện di xuất huyết thỏ âm tính. 
Kết quả điện di sản phẩm PCR phát hiện Rabbit Calicivirus gây bệnh xuất 
huyết thỏ (Rabbit haemorrhagic disease – RHD) từ mẫu máu thỏ nghiên cứu bằng 
cặp mồi chẩn đoán RCV-F – RCV-R. 
 Ghi chú: M: chỉ thị phân tử DNA của thực khuẩn thể Lambda được cắt bằng 
HindIII. 1: mẫu máu thỏ sử dụng trong nghiên cứu. (-): mẫu đối chứng âm. 
Kết quả: Phản ứng PCR cho kết quả âm tính với cặp mồi chẩn đoán RCV-F 
– RCV-R. Điều này chứng tỏ thỏ sử dụng trong nghiên cứu không bị nhiễm 
Calicivirus gây bệnh xuất huyết.