Luận án Nghiên cứu tạo giống gốc và thử nghiệm sản xuất vacxin vô hoạt phòng hội chứng rối loạn sinh sản và hô hấp ở lợn từ chủng virus phân lập tại Việt Nam

HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM 
¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯ 
PHẠM VĂN SƠN 
NGHIÊN CỨU TẠO GIỐNG GỐC VÀ THỬ NGHIỆM 
SẢN XUẤT VACXIN VÔ HOẠT PHÒNG HỘI CHỨNG 
RỐI LOẠN SINH SẢN VÀ HÔ HẤP Ở LỢN TỪ 
CHỦNG VIRUS PHÂN LẬP TẠI VIỆT NAM 
LUẬN ÁN TIẾN SĨ 
NHÀ XUẤT BẢN ĐẠI HỌC NÔNG NGHIỆP - 2018
HỌC VIỆN NÔNG NGHIỆP VIỆT NAM 
¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯ 
PHẠM VĂN SƠN 
NGHIÊN CỨU TẠO GIỐNG GỐC VÀ THỬ NGHIỆM 
SẢN XUẤT VACXIN VÔ HOẠT PHÒNG HỘI CHỨNG 
RỐI LOẠN SINH SẢN VÀ HÔ HẤP Ở LỢN TỪ 
CHỦNG VIRUS PHÂN LẬP TẠI VIỆT NAM 
Chuyên ngành: Bệnh lý học và chữa bệnh vật nuôi 
Mã số: 9.64.01.02 
Người hướng dẫn khoa học: 1. PGS.TS. Nguyễn Bá Hiên 
 2. TS. Nguyễn Văn Cảm 
HÀ NỘI, 2018
 i 
LỜI CAM ĐOAN 
 Tôi xin cam đoan đây là công trình nghiên cứu riêng của bản thân. Các kết 
quả nghiên cứu được trình bày trong luận án là trung thực, khách quan và chưa 
từng dùng bảo vệ để lấy bất kỳ học vị nào. 
 Tôi xin cam đoan rằng mọi sự giúp đỡ cho việc thực hiện luận án đã được 
cám ơn và các thông tin trích dẫn trong luận án này đều được chỉ rõ nguồn gốc. 
Hà Nội, ngày tháng năm 2018 
Tác giả luận án 
Phạm Văn Sơn
 ii 
LỜI CẢM ƠN 
Để hoàn thành luận án, tác giả đã nhận được sự giúp đỡ và tạo điều kiện 
của rất nhiều người, sau đây là lời cảm ơn chân thành của tác giả: 
 Trước hết, tôi xin bày tỏ lòng biết ơn sâu sắc tới PGS.TS. Nguyễn Bá Hiên 
và TS. Nguyễn Văn Cảm, người đã trực tiếp hướng dẫn tôi trong suốt quá trình 
nghiên cứu và hoàn thành luận án. Nhờ có sự hướng dẫn nhiệt tình và những ý 
kiến đóng góp quý báu của các thầy mà luận án của tôi đã được hoàn thành. 
 Tôi xin trân trọng cảm ơn Ban Giám đốc Học viện Nông nghiệp Việt 
Nam, Ban Quản lý đào tạo, Ban Chủ nhiệm khoa Thú y, Bộ môn Vi sinh vật - 
Truyền nhiễm, Phòng Thí nghiệm trọng điểm công nghệ sinh học Thú y, cùng 
toàn thể các thầy, cô giáo và cán bộ của Khoa Thú y - Học viện Nông nghiệp 
Việt Nam, đã trang bị cho tôi những kiến thức quý báu và giúp đỡ tôi hoàn thành 
công trình nghiên cứu này. 
 Trân trọng cảm ơn nhóm các nhà Khoa học nghiên cứu đề tài “Nghiên cứu 
công nghệ sản xuất vacxin vô hoạt phòng Hội chứng rối loạn sinh sản và hô hấp 
ở lợn”. Thuộc chương trình KC-04 do PGS.TS. Nguyễn Bá Hiên chủ nhiệm đã 
tạo điều kiện cho chúng tôi tham gia nhiều công đoạn nghiên cứu và cho phép tôi 
sử dụng một số kết quả nghiên cứu trong luận án này. 
 Cuối cùng, tôi xin chân thành cảm ơn gia đình, bạn bè, đồng nghiệp và cơ 
quan mà tôi đang công tác đã tạo điều kiện về thời gian, động viên, chia sẻ vật chất, 
tinh thần, giúp đỡ tôi trong quá trình học tập, nghiên cứu và hoàn thành luận án. 
Hà Nội, ngày tháng năm 2018 
Nghiên cứu sinh 
Phạm Văn Sơn 
 iii 
MỤC LỤC 
Lời cam đoan ..................................................................................................................... i 
Lời cảm ơn ........................................................................................................................ ii 
Mục lục ............................................................................................................................ iii 
Danh mục chữ viết tắt ..................................................................................................... vii 
Danh mục bảng ................................................................................................................ ix 
Danh mục hình ................................................................................................................. xi 
Trích yếu luận án ........................................................................................................... xiv 
Thesis abstract ................................................................................................................ xvi 
Phần 1. Mở đầu ............................................................................................................... 1 
1.1. Tính cấp thiết của đề tài ........................................................................................ 1 
1.2. Mục tiêu của đề tài ................................................................................................ 2 
1.2.1. Mục tiêu chung...................................................................................................... 2 
1.2.2. Mục tiêu cụ thể ...................................................................................................... 2 
1.3. Phạm vi nghiên cứu .............................................................................................. 2 
1.3.1. Đối tượng nghiên cứu ........................................................................................... 2 
1.3.2. Phạm vi nghiên cứu ............................................................................................... 3 
1.4. Những đóng góp mới của đề tài ............................................................................ 3 
1.5. Ý nghĩa khoa học và ý nghĩa thực tiễn của đề tài ................................................. 3 
1.5.1. Ý nghĩa khoa học của đề tài .................................................................................. 3 
1.5.2. Ý nghĩa thực tiễn của đề tài .................................................................................. 4 
Phần 2. Tổng quan tài liệu ............................................................................................. 5 
2.1. Lịch sử và tình hình dịch PRRS ở lợn .................................................................. 5 
2.1.1. Lịch sử và tình hình dịch PRRS ở lợn trên thế giới .............................................. 5 
2.1.2. Lịch sử và tình hình dịch PRRS ở lợn tại Việt Nam ............................................. 8 
2.2. Căn bệnh ............................................................................................................. 14 
2.2.1. Cấu trúc virus PRRS ........................................................................................... 14 
2.2.2. Phân loại virus PRRS .......................................................................................... 17 
2.2.3. Khả năng gây bệnh và sức đề kháng của virus PRRS......................................... 18 
2.3. Truyền nhiễm học ............................................................................................... 19 
2.3.1. Loài vật mắc bệnh ............................................................................................... 19 
 iv 
2.3.2. Chất chứa mầm bệnh và quá trình truyền lây ..................................................... 19 
2.3.3. Cơ chế sinh bệnh, phương thức truyền lây và đáp ứng miễn dịch ...................... 20 
2.4. Triệu chứng và bệnh tích .................................................................................... 22 
2.4.1. Triệu chứng lâm sàng .......................................................................................... 22 
2.4.2. Bệnh tích ............................................................................................................. 23 
2.5. Chẩn đoán và phòng trị bệnh .............................................................................. 24 
2.5.1. Chẩn đoán ........................................................................................................... 24 
2.5.2. Các biện pháp phòng trị bệnh ............................................................................. 25 
2.6. Giống gốc trong sản xuất vacxin ........................................................................ 27 
2.6.1. Định nghĩa ........................................................................................................... 27 
2.6.2. Cách chế tạo giống gốc ....................................................................................... 27 
2.6.3. Cách quản lý giống gốc ....................................................................................... 27 
2.6.4. Các phương pháp bảo quản giống gốc PRRSV trong phòng thí nghiệm ............ 28 
2.7. Nghiên cứu sản xuất vacxin phòng PRRS .......................................................... 30 
2.7.1. Sản xuất vacxin bằng phương pháp vô hoạt virus .............................................. 30 
2.7.2. Sản xuất vacxin bằng phương pháp nhược độc virus trên môi trườngtế bào ............. 31 
2.7.3. Phương pháp sản xuất vacxin thế hệ mới ........................................................... 32 
Phần 3. Nội dung, vật liệu và phương pháp nghiên cứu .................................................. 36 
3.1. Địa điểm nghiên cứu ........................................................................................... 36 
3.2. Thời gian nghiên cứu .......................................................................................... 36 
3.3. Vật liệu nghiên cứu ............................................................................................. 36 
3.4. Nội dung nghiên cứu ........................................................................................... 36 
3.4.1. Nghiên cứu biến đổi bệnh lý của lợn ở những ổ dịch PRRS và thu thập mẫu ........... 36 
3.4.2. Phân lập và tuyển chọn chủng giống gốc PRRSV .............................................. 36 
3.4.3. Nghiên cứu sản xuất thử nghiệm vacxin vô hoạt nhũ dầu phòng PRRS ............ 37 
3.5. Phương pháp nghiên cứu .................................................................................... 37 
3.5.1. Phương pháp mổ khám ....................................................................................... 37 
3.5.2. Phương pháp RT - PCR ...................................................................................... 37 
3.5.3. Phương pháp làm tiêu bản vi thể ......................................................................... 40 
3.5.4. Phương pháp nuôi cấy tế bào .............................................................................. 41 
3.5.5. Phương pháp nhân virus PRRS ........................................................................... 43 
3.5.6. Phương pháp xác định hiệu giá virus .................................................................. 43 
 v 
3.5.7. Phương pháp xác định quy luật sinh trưởng của virus ........................................ 43 
3.5.8. Phương pháp giải trình tự gen ............................................................................. 44 
3.5.9. Phương pháp tinh chế kháng nguyên virus và định lượng protein ..................... 45 
3.5.10. Phương pháp gây tối miễn dịch trên chuột ......................................................... 45 
3.5.11. Phương pháp trung hòa virus (phương pháp virus cố định và huyết thanh 
pha loãng) ............................................................................................................ 46 
3.5.12. Phương pháp IPMA ............................................................................................ 47 
3.5.13. Phương pháp kiểm tra vô trùng của giống PRRS (master seed và working seed)... 48 
3.5.14. Phương pháp kiểm tra thuần khiết của giống (master seed và workingseed) 
bằng kỹ thuật PCR/RT-PCR ............................................................................... 50 
3.5.15. Phương pháp nuôi cấy tế bào MARC-145 trên hệ thống Bioreactor .................. 50 
3.5.16. Phương pháp cô đặc virus PRRS bằng lọc tiếp tuyến ......................................... 50 
3.5.17. Phương pháp vô hoạt virus ................................................................................. 51 
3.5.18. Phương pháp kiểm tra sau vô hoạt ...................................................................... 51 
3.5.19. Phương pháp nhũ hóa vacxin .............................................................................. 52 
3.5.20. Phương pháp kiểm tra chỉ tiêu thuần khiết của vacxin ....................................... 52 
3.5.21. Kiểm tra chỉ tiêu an toàn ..................................................................................... 53 
3.5.22. Phương pháp kiểm tra chỉ tiêu hiệu lực của vacxin ............................................ 53 
3.5.23. Phương pháp Realtime RT-PCR ......................................................................... 54 
3.5.24. Phương pháp ELISA ........................................................................................... 55 
3.5.25. Phương pháp thống kê, xử lý số liệu .................................................................. 56 
Phần 4. Kết quả và thảo luận ....................................................................................... 57 
4.1. Nghiên cứu một số biểu hiện bệnh lý của lợn mắc PRRS .................................. 57 
4.1.1. Thu thập mẫu bệnh phẩm .................................................................................... 57 
4.1.2. Chẩn đoán PRRS bằng phương pháp RT-PCR ................................................... 58 
4.1.3. Nghiên cứu biến đổi bệnh lý đại thể ................................................................... 60 
4.1.4. Nghiên cứu biến đổi bệnh lý vi thể ..................................................................... 62 
4.2. Phân lập và tuyển chọn chủng giống gốc PRRS ..................................................... 65 
4.2.1. Phân lập virus PRRS trên môi trường tế bào MARC-145 .................................. 65 
4.2.2. Nghiên cứu sự ổn định một số đặc tính sinh học của các chủng virus PRRS 
phân lập tại Việt Nam ......................................................................................... 71 
4.2.3. Đặc tính sinh học phân tử của các chủng virus PRRS ........................................ 79 
 vi 
4.2.4. Nghiên cứu đáp ứng miễn dịch của động vật thí nghiệm với các chủng virus 
PRRS nghiên cứu ................................................................................................ 98 
4.2.5. Sản xuất giống gốc ............................................................................................ 102 
4.3. Nghiên cứu sản xuất thử nghiệm vacxin vô hoạt nhũ dầu phòng PRRS .......... 107 
4.3.1. Nhân giống sản xuất (Working seed) vacxin .................................................... 107 
4.3.2. Nghiên cứu sản xuất thử nghiệm vacxin vô hoạt PRRS ................................... 109 
4.3.3. Nghiên cứu kiểm nghiệm vacxin vô hoạt PRRS ............................................... 115 
Phần 5. Kết luận và kiến nghị .................................................................................... 123 
5.1. Kết luận ............................................................................................................. 123 
5.2. Kiến nghị ........................................................................................................... 123 
Danh mục công trình đã công bố có liên quan đến luận án .......................................... 124 
Tài liệu tham khảo ........................................................................................................ 125 
Phụ lục ................................................................. ... me virus (isolate ATCC VR-2332) in North America 
and experimental reproduction of the disease in gnotobiotic pigs. Journal of Veterinary 
Diagnostic Investigation. Vol 4. pp. 117-126. 
61. Dea S., R. Bilodeau, R. Athanaseous, R.A. Sauvageau and G.P. Martineau (1992). 
PRRS syndrome in Quebec: isolation of a virus serologically related to Lelystad 
virus. Veterinary Record. Vol 130. pp. 167-167. 
62. Dee S., J. Deen, K. Rossow, C. Weise, R. Eliason, S. Otake, H.S. Joo and C.Pijoan 
(2003). Mechanical transmission of porcine reproductive and respiratory syndrome 
virus throughout a coordinated sequence of events during warm weather. Canadian 
journal of veterinary research. Vol 67. pp. 12. 
63. Dee S., J. Deen, K. Rossow, C. Wiese, S. Otake, H.S. Joo and C. Pijoan (2002). 
Mechanical transmission of porcine reproductive and respiratory syndrome virus 
throughout a coordinated sequence of events during cold weather. Canadian Journal 
of Veterinary Research. Vol 66. pp. 232-239. 
64. Dokland T. (2010). The structural biology of PRRSV. Virus research. Vol 154. pp. 
86-97. 
65. Done S., D. Paton and M. White (1996). Porcine reproductive and respiratory 
syndrome (PRRS): a review, with emphasis on pathological, virological and 
diagnostic aspects. British veterinary journal. Vol 152. pp. 153-174. 
66. Fang Y., D. Y. Kim, S. Ropp, P. Steen, H. J.Christopher, E.A. Nelson and R. Rowland 
(2004). Heterogeneity in Nsp2 of European-like porcine reproductive and respiratory 
syndrome viruses isolated in the United States. Virus research. Vol 100. pp. 229-235. 
67. Feng Y., T. Zhao, T. Nguyen, K. Inui, Y. Ma, T.H. Nguyen, V.C. Nguyen, D. Liu, 
Q.A. Bui and L.T. To (2008). Porcine respiratory and reproductive syndrome virus 
variants, Vietnam and China, 2007. Emerg Infect Dis. Vol 14. pp. 1774-1776. 
68. Fernando A. (2016). Swine immune response against Porcine Reproductiveand 
Respiratory Syndrome, implications for broad coverage vaccination. Presented at 
the 19th Annual Meeting of the Federation of AsianVeterinary Medical 
Associations (FAVA), Ho Chi Minh City, Vietnam, September 6, 2016. 
 132 
69. Halbur P., P. Paul, M. Frey, J. Landgraf, K. Eernisse, X.J. Meng, M. Lum, J. 
Andrewsand and J. Rathje (1995a). Comparison of the pathogenicity of two US 
porcine reproductive and respiratory syndrome virus isolates with that of the 
Lelystad virus. Veterinary Pathology. Vol 32. pp. 648-660. 
70. Halbur P., P.S. Paul, M. Frey, J. Landgraf, K. Eernisse, X.J. Meng, M. Lum, J. 
Andrewsand and J. Rathje (1995b). Comparison of the pathogenicity of two US 
porcine reproductive and respiratory syndrome virus isolates with that of the 
Lelystad virus. Veterinary Pathology Online. Vol 32. pp. 648-660. 
71. Han J., G. Liu, Y. Wang and K.S. Faaberg (2007). Identification of nonessential 
regions of the nsp2 replicase protein of porcine reproductive and respiratory 
syndrome virus strain VR-2332 for replication in cell culture. Journal of virology. 
Vol 81. pp. 9878-9890. 
72. Han W., J.J. Wu, X.Y. Deng, Z. Cao, X. L. Yu, C.B. Wang, T.Z. Zhao, N.H. Chen, 
H.H. Hu and W. Bin (2009). Molecular mutations associated with the in vitro 
passage of virulent porcine reproductive and respiratory syndrome virus. Virus 
genes. Vol 38. pp. 276-284. 
73. Holtkamp D.J., J.B. Kliebenstein, E.J. Neumann, J.J. Zimmerman, H.F. Rotto, T.K. 
Yoder, C. Wang, P.E. Yeske, C.L. Mowrerand and C.A. Haley (2013). Assessment 
of the economic impact of porcine reproductive and respiratory syndrome virus on 
United States pork producers. Journal of Swine Health and Production. Vol 21. pp. 
72-84. 
74. Hu J. and C. Zhang (2014). Porcine reproductive and respiratory syndrome virus 
vaccines: current status and strategies to a universal vaccine. Transboundary and 
emerging diseases. Vol 61. pp. 109-120. 
75. Keffaber K. (1989). Reproductive failure of unknown etiol-ogy. Am. Assoc. Swine 
Pract. Newsl . Vol 1. pp. 1-9. 
76. Kim H., H.K. Kim, J.H. Jung, Y.J. Choi, J. Kim, C.G. Um, S.B. Hyun, S. Shin, B. 
Lee and G. Jang (2011). The assessment of efficacy of porcine reproductive 
respiratory syndrome virus inactivated vaccine based on the viral quantity and 
inactivation methods. Virology journal. Vol 8. pp. 323. 
77. Kovacs F. and G. Schagemann (2003). Efficacy of Ingelvac® PRRS MLV Against 
European Isolates, In: Proceedings–4th International Symposium on Emerging and 
Re-emerging Pig Diseases, Rome. pp. 111-112. 
 133 
78. Labarque G., G. S. Van, R. K. Van, H. Nauwynck and M.Pensaert (2003). 
Respiratory tract protection upon challenge of pigs vaccinated with attenuated 
porcine reproductive and respiratory syndrome virus vaccines. Veterinary 
microbiology. Vol 95.pp. 187-197. 
79. Lee J.A., B. Kwon, F.A. Osorio, A.K. Pattnaik, N.H. Lee, S.W. Lee, S.Y. Park, C. S. 
Song, I. S. Choi and J. B.Lee (2014). Protective humoral immune response induced 
by an inactivated porcine reproductive and respiratory syndrome virus expressing the 
hypo-glycosylated glycoprotein 5, Vaccine. Vol 32. pp. 3617-3622. 
80. Leng X., Z. Li, M. Xia, Y. He and H.Wu (2012). Evaluation of the efficacy of an 
attenuated live vaccine against highly pathogenic porcine reproductive and 
respiratory syndrome virus in young pigs. Clinical and Vaccine Immunology. Vol 
19. pp. 1199-1206. 
81. Loula T. (1991). Mystery pig disease. Agri-practice. Vol 12. pp. 23-34. 
82. Madsen K.G., C. Hansen, E. Madsen, B. Strandbygaard, A.Botner and K. Sorensen 
(1998). Sequence analysis of porcine reproductive and respiratory syndrome virus 
of the American type collected from Danish swine herds. Archives of virology. Vol 
143. pp. 1683-1700. 
83. Martelli P., P. Cordioli, L.G. Alborali, S. Gozio, E. De Angelis, L. Ferrari, G. 
Lombardi and P. Borghetti (2007). Protection and immune response in pigs 
intradermally vaccinated against porcine reproductive and respiratory syndrome 
(PRRS) and subsequently exposed to a heterologous European (Italian cluster) field 
strain. Vaccine. Vol 25. pp. 3400-3408. 
84. Meng X. (2000). Heterogeneity of porcine reproductive and respiratory syndrome 
virus: implications for current vaccine efficacy and future vaccine development. 
Veterinary microbiology. Vol 74. pp. 309-329. 
85. Mengeling W. and K. Lager (1990). Mystery Pig Disease: Evidence and 
considerations for its etiology, In: Proceedings of the Mystery Swine Disease 
Committee Meeting. 
86. Mengeling W.L., K.M. Lager, A.C. Vorwald and D.F. Clouser (2003). 
Comparative safety and efficacy of attenuated single-strain and multi-strain 
vaccines for porcine reproductive and respiratory syndrome. Veterinary 
microbiology. Vol 93. pp. 25-38. 
 134 
87. Meulenberg J.J., M.M. Hulst, E.J. Meijer, P.L. Moonen, A. Besten, E.P. Kluyver, 
G. Wensvoort and R.J. Moormann (1993). Lelystad virus, the causative agent of 
porcine epidemic abortion and respiratory syndrome (PEARS), is related to LDV 
and EAV. Virology. Vol 192. pp. 62-72. 
88. Mortensen S., H. Stryhn, R. Søgaard, A. Boklund, K.D. Stärk, J. Christensen and P. 
Willeberg (2002). Risk factors for infection of sow herds with porcine reproductive 
and respiratory syndrome (PRRS) virus. Preventive veterinary medicine. Vol 53. 
pp. 83-101. 
89. Murtaugh M., M. Elam and L. Kakach (1995). Comparison of the structural protein 
coding sequences of the VR-2332 and Lelystad virus strains of the PRRS virus. 
Archives of virology. Vol 140 1451-1460. 
90. Nelsen C.J., M.P. Murtaugh and K.S. Faaberg (1999). Porcine reproductive and 
respiratory syndrome virus comparison: divergent evolution on two continents. 
Journal of virology. Vol 73. pp. 270-280. 
91. Nelson E., H. J. Christopher, T. Drew, G. Wensvoort, J. Collins and D. Benfield 
(1993). Differentiation of US and European isolates of porcine reproductive and 
respiratory syndrome virus by monoclonal antibodies. Journal of Clinical 
Microbiology. Vol 31. pp. 3184-3189. 
92. Nodelijk G., M. Nielen, J. M.C. De and J.H. Verheijden (2003). A review of 
porcine reproductive and respiratory syndrome virus in Dutch breeding herds: 
population dynamics and clinical relevance. Preventive veterinary medicine. Vol 
60. pp. 37-52. 
93. OIE (2005). Porcine reproductive and respiratory syndrome in south afica: Fllow- 
up report. no. 2. disease information. Vol 18. pp. 422-423. 
94. Oleksiewicz M., A. Bøtner, K.G. Madsen and T.Storgaard (1998). Sensitive detection 
and typing of porcine reproductive and respiratory syndrome virus by RT-PCR 
amplification of whole viral genes. Veterinary microbiology. Vol 64. pp. 7-22. 
95. Otake S., S. Dee, L. Jacobson, M. Torremorell and C. Pijoan (2002). Evaluation of 
aerosol transmission of porcine reproductive and respiratory syndrome virus under 
controlled field conditions. The Veterinary Record. Vol 150. pp. 804-808. 
96. Papatsiros V. (2012). Porcine respiratory and reproductive syndrome virus 
vaccinology: A review for commercial vaccines. American Journal of Animal and 
Veterinary Sciences. Vol 7. pp. 149. 
 135 
97. Paton D., I. Brown, S. Edwards and G. Wensvoort (1991). Blue ear'disease of pigs. 
Veterinary Record. Vol 128. pp. 617-617. 
98. Pejsak Z., T. Stadejek and D. I. Markowska (1997). Clinical signs and economic 
losses caused by porcine reproductive and respiratory syndrome virus in a large 
breeding farm. Veterinary microbiology. Vol 55. pp. 317-322. 
99. Pitkin A., J. Deen and S. Dee (2009a). Further assessment of fomites and personnel as 
vehicles for the mechanical transport and transmission of porcine reproductive and 
respiratory syndrome virus. Can J Vet Res. Vol 73. pp. 298-302. 
100. Pitkin A., J. Deen, S. Otake, R. Moon and S. Dee (2009b). Further assessment of 
houseflies (Musca domestica) as vectors for the mechanical transport and 
transmission of porcine reproductive and respiratory syndrome virus under field 
conditions. Canadian Journal of Veterinary Research. Vol 73. pp. 91. 
101. Pol J., D. J. Van, G. Wensvoort and C. Terpstra (1991). Pathological, 
ultrastructural, and immunohistochemical changes caused by Lelystad virus in 
experimentally induced infections of mystery swine disease (synonym: porcine 
epidemic abortion and respiratory syndrome (PEARS). Veterinary Quarterly. Vol 
13. pp. 137-143. 
102. Rossow K., J. Collins, S. Goyal, E. Nelson, H. J. Christopher and D. Benfield 
(1995). Pathogenesis of porcine reproductive and respiratory syndrome virus 
infection in gnotobiotic pigs. Veterinary pathology. Vol 32. pp. 361-373. 
103. Segales J., M. Domingo, M. Balasch, G. Solano and C. Pijoan (1998). 
Ultrastructural study of porcine alveolar macrophages infected in vitro with 
porcine reproductive and respiratory syndrome (PRRS) virus, with and without 
Haemophilus parasuis. Journal of comparative pathology. Vol 118. pp. 231-243. 
104. Shimizu, M., S. Yamada, Y. Murakami, T. Morozumi, H. Kobayashi, K. Mitani, 
and K. Yamamoto (1994). Isolation of Porcine Reproductive and Respiratory 
Syndrome (PRRS) virus from Heko - Hekeo disease of pigs. J Vet Med Sci. Vol 
56. pp. 389-391. 
105. Solano G.I., J. Segalés, J.E. Collins, T.W. Molitor and C. Pijoan (1997). Porcine 
reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSv) interaction with 
Haemophilus parasuis. Veterinary microbiology. Vol 55. pp. 247-257. 
 136 
106. Suradhat S., R. Thanawongnuwech and Y. Poovorawan (2003). Upregulation of IL-
10 gene expression in porcine peripheral blood mononuclear cells by porcine 
reproductive and respiratory syndrome virus. Journal of general virology, 84, 453-459 
107. Terpstra C., G. Wensvoort and J. Pol (1991). Experimental reproduction of 
porcine epidemic abortion and respiratory syndrome (mystery swine disease) by 
infection with Lelystad vims: Koch's postulates fulfilled. Veterinary Quarterly. 
Vol 13. pp. 131-136. 
108. Thomas G. G. (2016). Developing a holistic approach to control PRRSV 
infections building astrong offense to combat PRRSV. 19th Federation of Asian 
Veterinary Associations Congress. Sep 6-9. Ho Chi Minh City, Viet Nam. 
109. Tian K., X. Yu, T. Zhao, Y. Feng, Z. Cao, C. Wang, Y. Hu, X. Chen, D. Hu, X. 
Tian (2007). Emergence of fatal PRRSV variants: unparalleled outbreaks of 
atypical PRRS in China and molecular dissection of the unique hallmark. PloS 
one 2, e526. 
110. Tong G. Z., Y.J. Zhou, X.F. Hao, Z. J. Tian, T. Q. An and H.J. Qiu (2007). Highly 
pathogenic porcine reproductive and respiratory syndrome, China. Emerging 
infectious diseases. Vol 13. pp. 1434. 
111. Van N.A.P., J. Langeveld and J. Meulenberg (2002). PRRSV antigenic sites 
identifying peptide sequences of PRRS virus for use in vaccines or diagnostic 
assays. Google Patents. 
112. Wensvoort G., C. Terpstra, J. Pol, L. E. Ter, M. Bloemraad, K. E. De, C. Kragten, L.D. 
B. Van, B A. Den and F. Wagenaar (1991). Mystery swine disease in The 
Netherlands: the isolation of Lelystad virus. Veterinary Quarterly. Vol 13. pp. 121-130. 
113. White M. (1991). Blue ear'disease of pigs. Veterinary Record. United Kingdom. 
114. Zimmerman J., K.J. Yoon, R. Wills and S. Swenson (1997). General overview of 
PRRSV: a perspective from the United States. Veterinary microbiology. Vol 55. 
pp. 187-196. 
115. Zuckermann F.A., E.A. Garcia, I.D. Luque, H. J. Christopher, A. Doster, M. Brito 
and F. Osorio (2007). Assessment of the efficacy of commercial porcine 
reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV) vaccines based on 
measurement of serologic response, frequency of gamma-IFN-producing cells and 
virological parameters of protection upon challenge. Veterinary microbiology. 
Vol 123. pp. 69-85. 
 137 
PHỤ LỤC 
PHỤ LỤC 1. MỘT SỐ HÌNH ẢNH KIỂM TRA VÔ TRÙNG CỦA GIỐNG GỐC 
Hình 1. Môi trường dinh dưỡng trước khi kiểm tra vô trùng 
Hình 2. Môi trường dinh dưỡng sau khi kiểm tra vô trùng 
Hình 3. Môi trường dinh dưỡng sau khi kiểm tra vô trùng 
 138 
PHỤ LỤC II. MỘT SỐ HÌNH ẢNH KIỂM TRA VÔ TRÙNG 
CÁC LÔ GIỐNG SẢN XUẤT 
Hình 4. Giống sản xuất được lấy để 
kiểm tra vô trùng 
Hình 5. Kiểm tra vô trùng giống sản 
xuất trên thạch Macconkey 
Hình 6. Kết quả kiểm tra giống sản 
xuất trên thạch Sabouraud 
Hình 7. Kết quả kiểm tra giống sản 
xuất trên thạch Macconkey 
Hình 8. Kết quả kiểm tra giống sản 
xuất trên Canh thang PPLO 
Hình 9. Kết quả kiểm tra giống sản 
xuất trên Thioglycollat 
 139 
PHỤ LỤC III. MỘT SỐ HÌNH ẢNH CỦA LỢN THÍ NGHIỆM 
Hình 10. Phổi lợn được tiêm vacxin 
vô hoạt PRRS sau công cường độc 
Hình 11. Phổi lợn được tiêm vacxin 
vô hoạt sau công cường độc (10X) 
Hình 12. Phổi lợn không tiêm 
vacxin sau công cường độc, viêm, 
xuất huyết 
Hình 13. Phổi lợn không tiêm vacxin 
sau công cường độc, viêm kẽ phổi 
(10X) 
Hình 14. Triệu chứng lâm sàng của 
lợn không tiêm vacxin sau công 
cường độc (tím tai) 
Hình 15. Bệnh tích đại thể của lợn 
không tiêm vacxin sau công cường 
độc (thận xuất huyết điểm)