Luận án Sử dụng ngọn lá cây thức ăn chứa tanin trong khẩu phần để giảm thiểu phát thải khí mêtan trong chăn nuôi bò thịt

i 
 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ NÔNG NGHIỆP VÀ PTNT 
VIỆN CHĂN NUÔI 
PHẠM QUANG NGỌC 
SỬ DỤNG NGỌN LÁ CÂY THỨC ĂN CHỨA TANIN TRONG 
KHẨU PHẦN ĐỂ GIẢM THIỂU PHÁT THẢI KHÍ MÊTAN 
TRONG CHĂN NUÔI BÒ THỊT 
LUẬN ÁN TIẾN SĨ NÔNG NGHIỆP 
CHUYÊN NGÀNH: CHĂN NUÔI 
MÃ SỐ : 9 62 01 05 
NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: 1. TS. PHẠM KIM CƯƠNG 
 2. TS. NGUYỄN THÀNH TRUNG 
HÀ NỘI, 2019 
ii 
LỜI CAM ĐOAN 
 Tôi xin cam đoan, đây là công trình nghiên cứu của riêng tôi dưới sự 
hướng dẫn của các thầy và sự giúp đỡ của các đồng nghiệp trong suốt thời 
gian từ năm 2013 - 2019. Các số liệu, kết quả nêu trong luận án là trung thực 
và chưa được công bố trong bất kỳ công trình nào khác. Mọi trích dẫn đều có 
nguồn gốc rõ ràng. 
Tác giả của luận án 
 Phạm Quang Ngọc 
iii 
LỜI CẢM ƠN 
Để hoàn thành luận án này, tôi đã nhận được sự quan tâm, giúp đỡ của 
các thầy, cô giáo, các tập thể, cá nhân cùng bạn bè đồng nghiệp. 
Trước tiên, tôi xin bày tỏ sự biết ơn sâu sắc tới các thầy hướng dẫn 
khoa học: TS. Phạm Kim Cương, TS. Nguyễn Thành Trung và cố GS.TS. Vũ 
Chí Cương. Các thầy đã tận tâm và nhiệt tình giúp đỡ, truyền đạt kiến thức 
chuyên môn, trao đổi phương pháp luận, ý tưởng và nội dung nghiên cứu, 
động viên nghiên cứu sinh để hoàn thành luận án. 
Tôi xin chân thành cảm ơn Ban giám đốc Viện Chăn nuôi, Phòng Đào 
tạo và Thông tin đã giúp đỡ tôi rất nhiều trong quá trình học tập và tạo điều 
kiện thuận lợi để tôi hoàn tất các thủ tục bảo vệ luận án. 
Tôi xin chân thành cảm ơn, TS. Chu Mạnh Thắng trưởng phòng Đào 
tạo và Thông tin và các cán bộ làm việc tại quý phòng. Đồng thời, tôi xin cảm 
ơn PGS.TS. Mai Văn Sánh, các cán bộ nghiên cứu tại Bộ môn Dinh dưỡng và 
thức ăn chăn nuôi, Trung tâm thực nghiệm và bảo tồn vật nuôi, Trung tâm 
nghiên cứu bò và đồng cỏ Ba Vì đã có nhiều trao đổi và giúp đỡ tôi trong việc 
hoàn thành luận án. 
Nhân dịp này, tôi xin chân thành cám ơn các cơ quan của tỉnh Ninh 
Bình đã tạo mọi điều kiện và nhiệt tình giúp đỡ tôi trong quá trình học tập và 
hoàn thành luận án. 
Cuối cùng, tôi xin được dành những tình cảm, lời cảm ơn sâu sắc nhất 
tới toàn thể người thân trong gia đình, bạn bè thân thiết, đặc biệt là vợ và các 
con của tôi đã luôn động viên, giúp đỡ tôi trong suốt quá trình học tập và 
hoàn thành bản luận án này. 
 Nghiên cứu sinh 
 Phạm Quang Ngọc 
iv 
MỤC LỤC 
Nội dung Trang 
MỞ ĐẦU ......................................................................................................... 1 
1. Đặt vấn đề .................................................................................................... 1 
2. Mục tiêu ....................................................................................................... 2 
3. Phạm vi nghiên cứu ...................................................................................... 3 
4. Ý nghĩa khoa học và thực tiễn ...................................................................... 3 
5. Những đóng góp mới của luận án ................................................................ 3 
CHƯƠNG I: TỔNG QUAN TÀI LIỆU ............................................................ 5 
1. 1. SƠ LƯỢC VỀ TANIN ................................................................................... 5 
1.1.1. Cấu trúc hóa học của tanin ..................................................................... 5 
1.1.2. Đặc điểm sinh học của Tanin ................................................................. 8 
1.2. ẢNH HƯỞNG CỦA NGUỒN TANIN TRONG KHẨU PHẦN ĂN ĐẾN 
QUÁ TRÌNH LÊN MEN VÀ KHẢ NĂNG SẢN XUẤT CỦA GIA SÚC 
NHAI LẠI 9 
1.2.1. Lượng thức ăn ăn vào ........................................................................... 9 
1.2.2. Khả năng tiêu hóa khẩu phần ................................................................ 11 
1.2.3. Quá trình lên men ở dạ cỏ .................................................................... 11 
1.2.4. Hiệu quả tích cực của tanin ................................................................. 13 
1.2.5. Tác dụng của tanin trong chăn nuôi ....................................................... 16 
1.3. QUÁ TRÌNH SẢN SINH KHÍ MÊTAN TRONG DẠ CỎ .............................. 17 
1.4. MỘT SỐ GIẢI PHÁP GIẢM PHÁT THẢI KHÍ NHÀ KÍNH Ở GIA SÚC NHAI 
LẠI ................................................................................................... 19 
1.4.1. Một số giải pháp chung giảm thiểu phát thải khí nhà kính ................ 19 
1.4.2. Một số giải pháp dinh dưỡng giảm thiểu phát thải khí nhà kính ....... 20 
1.5. TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU TRONG VÀ NGOÀI NƯỚC..................... 39 
1.5.1. Tình hình nghiên cứu giảm thiểu mêtan sinh ra từ chăn nuôi bò thịt ở 
trên thế giới ............................................................................................ 39 
1.5.2. Tình hình nghiên cứu giảm thiểu mêtan sinh ra từ chăn nuôi bò thịt ở 
Việt Nam ................................................................................................ 45 
1.6. GIỚI THIỆU MỘT SỐ CÂY CHỨA TANIN SỬ DỤNG TRONG 
NGHIÊN CỨU .......................................................................................... 47 
v 
Nội dung Trang 
1.6.1. Lá chè (Camellia sinensis) .................................................................... 47 
1.6.2. Lá keo tai tượng (Acacia mangium Wild) ............................................ 47 
1.6.3. Lá chè đại (Trichanthera gigantea) ....................................................... 48 
1.6.4. Lá keo lá tràm (Acacia auriculiformis) .................................................. 49 
1.6.5. Lá cây keo dậu (Leucaena leucocephala) ........................................... 50 
1.6.6. Ngọn lá sắn (Manihot esculenta Crantz) ............................................... 51 
CHƯƠNG II: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU ..................... 52 
2.1. ĐỐI TƯỢNG, THỜI GIAN VÀ ĐỊA ĐIỂM NGHIÊN CỨU .................. 52 
2.1.1. Đối tượng nghiên cứu ............................................................................ 52 
2.1.2. Địa điểm nghiên cứu .............................................................................. 52 
2.1.3. Thời gian nghiên cứu ............................................................................. 52 
2.2. NỘI DUNG NGHIÊN CỨU ..................................................................... 52 
2.2.1. Xác định thành phần hóa học và giá trị dinh dưỡng của một số ngọn lá 
cây thức ăn chứa tanin cho gia súc nhai lại ............................................ 52 
2.2.2. Xác định ảnh hưởng của nguồn và mức bổ sung một số loại ngọn lá 
cây thức ăn chứa tanin vào chất nền đến tốc độ và đặc điểm sinh khí in 
vitro, lượng mêtan sản sinh, tỷ lệ tiêu hóa in vitro, giá trị năng lượng 
ME và lượng axit béo mạch ngắn ........................................................... 52 
2.2.3. Xác định ảnh hưởng của mức bổ sung ngọn lá cây thức ăn chứa tanin 
vào khẩu phần đến lượng mêtan phát thải tỷ lệ tiêu hóa và tích lũy nitơ 
ở bò lai Sind sinh trưởng ...................................................................... 53 
2.2.4. Xác định ảnh hưởng của mức bổ sung ngọn lá cây thức ăn chứa tanin 
bổ sung vào khẩu phần đến phát thải mêtan, tăng khối lượng và hiệu 
quả chuyển hóa thức ăn của bò lai Sind sinh trưởng .............................. 53 
2.3. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU ............................................................. 53 
2.3.1. Xác định thành phần hóa học và giá trị dinh dưỡng của một số ngọn lá 
cây thức ăn chứa tanin cho gia súc nhai lại ........................................... 53 
2.3.2. Xác định ảnh hưởng của nguồn và mức bổ sung một số loại ngọn lá 
cây thức ăn chứa tanin vào chất nền đến tốc độ và đặc điểm sinh khí in 
vitro, lượng mêtan sản sinh, tỷ lệ tiêu hóa in vitro, giá trị năng lượng 
ME và lượng axit béo mạch ngắn ........................................................... 56 
2.3.3. Xác định ảnh hưởng của mức bổ sung ngọn lá cây thức ăn chứa tanin 
vào khẩu phần đến lượng mêtan phát thải, tỷ lệ tiêu hóa và tích lũy 
nitơ ở bò lai Sind sinh trưởng ................................................................. 63 
vi 
Nội dung Trang 
2.3.4. Xác định ảnh hưởng của mức bổ sung ngọn lá cây thức ăn chứa tanin 
bổ sung vào khẩu phần đến phát thải mêtan, tăng khối lượng và hiệu 
quả chuyển hóa thức ăn của bò lai Sind sinh trưởng .............................. 67 
CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN ...................................................... 71 
3.1. THÀNH PHẦN HÓA HỌC VÀ GIÁ TRỊ DINH DƯỠNG CỦA MỘT SỐ 
NGỌN LÁ CÂY THỨC ĂN CHỨA TANIN ........................................................... 71 
3.2. ẢNH HƯỞNG CỦA NGUỒN VÀ MỨC BỔ SUNG MỘT SỐ LOẠI NGỌN 
LÁ CÂY THỨC ĂN GIÀU TANIN VÀO CHẤT NỀN ĐẾN TỐC ĐỘ VÀ 
ĐẶC ĐIỂM SINH KHÍ IN VITRO, LƯỢNG MÊTAN SẢN SINH, TỶ LỆ 
TIÊU HÓA IN VITRO, GIÁ TRỊ NĂNG LƯỢNG ME VÀ LƯỢNG AXIT 
BÉO MẠCH NGẮN .......................................................................................... 
77 
3.2.1. Thành phần hóa học của các khẩu phần thí nghiệm ............................. 78 
3.2.2. Ảnh hưởng của loại lá bổ sung và lượng tanin bổ sung đến lượng khí 
tích lũy của các khẩu phần thí nghiệm (ml) .......................................... 80 
3.2.3. Ảnh hưởng của loại lá bổ sung và lượng tanin bổ sung đến động thái 
sinh khí in vitro của các khẩu phần thí nghiệm .................................... 83 
3.2.4. Ảnh hưởng của loại lá bổ sung và lượng tanin bổ sung đến tỷ lệ tiêu 
hóa in vitro, ME và SCFA của các khẩu phần thí nghiệm .................... 87 
3.2.5. Ảnh hưởng của loại lá bổ sung và lượng tanin bổ sung đến lượng 
mêtan sản sinh ra sau 6 giờ ủ của các khẩu phần thí nghiệm .............. 90 
3.2.6. Ảnh hưởng của loại lá bổ sung (nguồn tanin) trong khẩu phần thí 
nghiệm đến lượng mêtan sinh ra, lên men tiêu hóa dạ cỏ trong điều 
kiện in vitro ............................................................................................ 98 
3.2.7. Ảnh hưởng của mức tanin trong khẩu phần thí nghiệm đến lượng 
mêtan sinh ra, lên men tiêu hóa dạ cỏ trong điều kiện in vitro ............... 100 
3.3. ẢNH HƯỞNG CỦA BỔ SUNG NGỌN LÁ CÂY KEO DẬU VỚI CÁC TỶ 
LỆ KHÁC NHAU TRONG KHẨU PHẦN ĐẾN TỶ LỆ TIÊU HÓA, NITƠ 
TÍCH LŨY VÀ LƯỢNG MÊTAN PHÁT THẢI Ở BÒ LAI SIND SINH 
TRƯỞNG..................................................................................................... 
102 
3.3.1. Tỷ lệ tiêu hóa in vivo các thành phần dinh dưỡng có trong khẩu phần .. 102 
3.3.2. Cân bằng nitơ ở bò được cho ăn các khẩu phần thí nghiệm .................. 104 
3.3.3. Lượng khí mêtan phát thải .................................................................... 106 
3.4. KHẢ NĂNG TĂNG TRỌNG, HIỆU QUẢ SỬ DỤNG THỨC ĂN, PHÁT 
THẢI KHÍ MÊTAN VÀ HIỆU QUẢ KINH TẾ CỦA BÒ LAI SIND SINH 
TRƯỞNG KHI ĂN KHẨU PHẦN BỔ SUNG KEO DẬU VỚI CÁC TỶ LỆ 
vii 
Nội dung Trang 
KHÁC NHAU ......................................................................................... 108 
3.4.1. Lượng thức ăn thu nhận của bò thí nghiệm .......................................... 108 
3.4.2. Khả năng tăng khối lượng của bò thí nghiệm ....................................... 110 
3.4.3. Hiệu quả sử dụng thức ăn của bò thí nghiệm ....................................... 113 
3.4.4. Phát thải khí mêtan của bò thí nghiệm ................................................ 114 
3.4.5. Sơ bộ tính toán hiệu quả kinh tế ........................................................... 117 
CHƯƠNG IV: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ ....................................................... 119 
4.1. KẾT LUẬN ............................................................................................... 119 
4.2. ĐỀ NGHỊ .................................................................................................. 119 
TÀI LIỆU THAM KHAM KHẢO ............................................................... 120 
PHỤ LỤC ....................................................................................................... 152 
viii 
DANH MỤC CÁC CHỮ CÁI VIẾT TẮT 
ABBH Axit béo bay hơi 
ADF Xơ không tan trong dung môi axit 
ADG Tăng khối lượng bình quân/ngày 
KTS Khoáng tổng số 
CP Protein thô 
CPD Tiêu hóa protein 
CRD Ngẫu nhiên hoàn toàn 
cs cộng sự 
CT Tanin cô đặc 
DM Vật chất khô 
DMI Vật chất khô ăn vào 
FCM Sữa tiêu chuẩn 
FCR Hệ số chuyển đổi thức ăn 
HT Tanin thủy phân 
ME Năng lượng trao đổi 
MPG Lượng khí mêtan sản sinh trên mỗi kg tăng khối lượng 
MRPG Khả năng giảm thiểu khí mêtan sản sinh trên mỗi kg tăng 
khối lượng 
NAN Nitơ không phải từ amoniac 
NDF Xơ không tan trong dung môi trung tính 
NDFD Tiêu hóa NDF 
OM Chất hữu cơ 
OMD Tiêu hóa chất hữu cơ 
RUP Protein tiêu hóa không phân giải ở dạ cỏ 
SCFA Axit béo mạch ngắn 
SEM Sai số số trung bình 
VCK Vật chất khô 
ix 
DANH MỤC BẢNG BIỂU 
Nội dung Trang 
Bảng 2.1. Thành phần và tỷ lệ của khẩu phần cơ sở - chất nền ............ 56 
Bảng 2.2. Sơ đồ bố trí thí nghiệm ......................................................... 57 
Bảng 2.3. Tỷ lệ các nguyên liệu thức ăn và giá trị dinh dưỡng của 
khẩu phần thí nghiệm in vivo (% VCK)................................ 63 
Bảng 2.4. Sơ đồ thí nghiệm in vivo ....................................................... 64 
Bảng 2.5. Sơ đồ thí nghiệm nuôi dưỡng ............................................... 67 
Bảng 2.6. Tỷ lệ các nguyên liệu thức ăn và giá trị dinh dưỡng của 
khẩu phần thí nghiệm (% VCK)............................................ 68 
Bảng 3.1. Thành phần hóa học của một số ngọn lá cây thức ăn chứa 
tanin (% theo VCK) ............................................................. 71 
Bảng 3.2. Tốc độ sinh khí in vitro gasproduction, giá trị năng lượng 
và tỷ lệ tiêu hóa chất hữu cơ một số ngọn lá cây thức ăn 
chứa tanin.............................................................................. 73 
Bảng 3.3. Hàm lượng tanin và nồng độ mêtan sản sinh sau 6h ủ một 
số ngọn lá cây thức ăn giàu tanin trong điều kiện in vitro.... 75 
Bảng 3.4. Thành phần hóa học của các khẩu phần thí nghiệm 
(%VCK).. 77 
Bảng 3.5. Lượng khí tích lũy của các khẩu phần thí nghiệm (ml) ........ 80 
Bảng 3.6: Động thái sinh khí của các khẩu phần thí nghiệm ............... 84 
Bảng 3.7. Ảnh hưởng của loại lá và hàm lượng tanin tổng số đến tỷ lệ 
tiêu hóa in vitro, giá trị năng lượng trao đổi (ME) và số 
lượng các axit béo mạch ngắn (SCFA) của các khẩu phần 
thí nghiệm ........................................................................... 87 
Bảng 3.8. Ảnh hưởng của loại lá và hàm lượng tanin tổng số đến 
nồng độ và thể tích khí mêtan sản sinh ra sau 6 giờ ủ......... 90 
Bảng 3. . Kết quả phân tích phương sai cho các biến của phương trình 1 93 
Bảng 3.10. Kết quả phân tích phương sai cho các biến của phương trình 2 .. 94 
x 
Nội dung Trang 
Bảng 3.11. Kết quả xác định ảnh hưởng của loại lá bổ sung và lượng 
tanin tổng số bổ sung đến nồng độ và thể tích khí mêtan 
sản sinh ra ... sevier 
Swain T. 1979. Tannins and lignins. In: Rosenthal, G.A. and Janzen, D.H. (Eds.), 
Herbivores: Their Interaction with Secondary Plant Metabolites, Academic 
Press, New York, pp. 657–682. 
Takahashi, J., Ikeda, M., Matsuoka, S. and Fujita, H. 1998. Prophylactic effect of L-
cysteine to acute and subclinical nitrate toxicity in sheep. Anim. Feed Sci. 
Technol. 74: 273–280. 
Tan ND, Wanapat M, Uriyapongson S, Cherdthong A, Pilajun R. 2012. Enhancing 
mulberry leaf meal with urea by pelleting to improve rumen fermentation in 
cattle. Asian-Aust J Anim Sci 2012,25:452–461. 
Tarawali.S., Herrero, M., Descheemaeker, K, Grings, E. and M. Blummel, 2011. 
Pathways for sustainable development of mix crop livestock systems: Taking 
a livestock and pro-poor approach. Livestock Science 139, 11-21 
Tekippe, J.A., Hristov, A.N., Heyler, K.S., Cassidy, T.W., Zheljazkov, V.D., 
Ferreira, J.F.S., Karnati, S.K. and Varga, G.A. 2011. Rumen fermentation 
 152 
and production effects of Origanum vulgare L. leaves in lactating dairy cows. 
J. Dairy Sci. 94: 5065–5079. 
Terrill TH, Windham WR, Hoveland CS and Amos HE (1989). Forage preservation 
method influences on tannin concentration, intake, and digestibility of 
sericea lespedeza by sheep. Agron., J. 81: 435–439. 
Terrill, T.H., Douglas, G.B., Foote, A.G., Purchas, R.W., Wilson, G.F. and Barry, 
T.N. 1992. Effect of condensed tannins upon body growth,wool growth and 
rumen metabolism in sheep grazing sulla (Hedysarum coronarium) and 
perennial pasture. J. Agric. Sci. Camb. 119: 265–273. 
Terrill, T.H., Waghorn, G.C., Wolley, D.J., McNabb, W.C. and Barry, T.N. 1994. 
Assay and digestion of 14C-labelled condensed tannin in the gastro intestinal 
tract of sheep. Br. J. Nutri.72: 467–477. 
Tesema, Z., Baars M. R. T. and Alemu Yami. 2002. Effect of plant height at 
cutting, source and Level of fertilizer on yield and nutritional Quality of 
Napier grass (Pennisetum purpureum (L.) Schumach.) African Journal of 
Range and Forage. 
Thorne P.S., 2007. Environmental health impacts of concentrated animal feeding 
operations: anticipating hazards searching for solutions. Environ Health 
Perspect 115:296-297. 
Tiemann, T.T., Lascano, C.E., Kreuzer, M. and Hess, H. D. 2008. The ruminal 
degradability of fibre explains part of the low nutritional value and reduced 
methanogenesis in highly tanniniferous tropical legumes, J, Sci, Food Agric, 
88, 1794–1803. 
Tiemann, T.T., Lascano, C.E., Wettstein, H.R., Mayer, A.C., Kreuzer, M. and Hess, 
H.D. 2008. Effect of the tropical tannin-rich shrub legumes Calliandra 
calothyrsus and Flemingia macrophylla on methane emission and nitrogen 
and energy balance in growing lambs. Animal 2 (05), 790-799. 
Tomkins, N.W., Colegate, S.M. and Hunter, R.A. 2009. A bromochloromethane 
formulation reduces enteric methanogenesis in cattle fed grain-based diets. 
Anim. Prod. Sci. 49: 1053–1058. 
Traore, I. A, G. C. Akouedegni, S. Babatounde, R. H. Bosma. 2010. Effects of 
protein supplementation during the dry season on the feed intake and 
performances of Borgou cows in the sudanian zone of Benin. Adv. Anim. 
Biosci. 1: 449-459. 
Udo, H.M.J., Aklilu, H.A., Phong, L.T., Bosma, R.H., Budisatria, I.G.S., Patil, 
B.R., Samdup, T. and Bebe, B.O. 2011. Impact of intensification of 
 153 
different types of livestock production in smallholder crop-livestock 
systems. Livest. Sci. 139: 22–30. 
Ungerfeld, E.M., Kohn, R.A., Wallace, .J. and Newbold, C.J. 2007. Meta-analysis 
of fuma- rate effects on methane production in ruminal batch cultures. J. 
Anim. Sci. 85: 2556–2563. 
Ushida, K and Jouany, JP, 1996. Methane production associated with rumen-
ciliated protozoa and its effect on protozoan activity. Lett. Appl. Microbiol., 
vol. 23, pp. 129-32. 
Van Nevel, C. J., D. I. Demeyer, H. K. Henderickx, andJ. A. Martin. 1970. A 
simple method for the simultaneous determination of gas production and 
volatile fatty acid concentration in the rumen. Zeitschr. Tierphys. Tierernahr. 
Futtermittelk. 26, 91–100. 
Van Zijderveld, S.M., Gerrits, W.J.J., Apajalahti, J.A., Newbold, J.R., Dijkstra, J., 
Leng, R.A. and Perdok, H.B. 2010. Nitrate and sulfate: Effective alternative 
hydrogen sinks for mitigation of ruminal methane production in sheep. J. 
Dairy Sci. 93: 5856–5866. 
Van Zijderveld, S.M., ijkstra, J., Perdok, H.B., Newbold, J.R. and Gerrits, W.J.J. 
2011c. Dietary inclusion of diallyl disulfide, yucca powder, calcium 
fumarate, an extruded linseed product, or medium-chain fatty acids does not 
affect methane production in lactating dairy cows. J. Dairy Sci. 94: 3094–
3104. 
Van Zijderveld, SM, Dijkstra, J, Gerrits, WJJ, Newbold, JR and Perdok, HB, 2010a. 
Dietary nitrate persistently reduces enteric methane production in lactating 
dairy cows. paper presented to Greenhouse gases and animal agriculture 
conference, Banff, Canada, October 3-8, 2010 
Van Zijderveld, SM, Gerrits, WJJ, Apajalahti, JA, Newbold, JR, Dijkstra, J, Leng, 
RA and Perdok, HB, 2010b. Nitrate and sulfate: Effective alternative 
hydrogen sinks for mitigation of ruminal methane production in sheep. 
Journal of Dairy Science, vol. 93, no. 12, pp. 5856-66 
Virapol Jamsawat, Suranee Laowattanakul, and Jaruwat Chinsuwan.2010. 
Efficiency of Using Cassava Chip as Based Energy and Leucaena Leaf as 
Protein Supplement for Dairy Heifer Feed. Pp: 328-333.RMUTP Research 
Journal Special Issue. The 4th Rajamangala University of Technology 
International Conference. 
 154 
Waghorn G. 1996. Condensed tannins and nutrient absorption from the small 
intestine. Proc of the 1996 Canadian Society of Animal Science Annual 
Meeting, Lethbridge, Canada (Rode L.M., ed.). pp. 175-194. 
Waghorn GC and McNabb WC. 2003. Consequences of plant phenolic compounds 
for productivity and health of ruminants. Proceedings of the Nutrition 
Society 62, 383-392. 
Waghorn GC, Reed JD and Ndlovu LR. 1999. Condensed tannins and herbivore 
nutrition. In Proceedings of the XVIIth International Grasslands Congress 3: 
153-156. 
Waghorn GC, Shelton ID and Mcnabb WC. 1994a. Effects of condensed tannins in 
Lotus pedunculatus on its Tannins and ruminant nutrition on its nutritive 
value for sheep. 1. Non-nitrogenous aspects. J Agr Sci 123: 99-107. 
Waghorn GC, Shelton ID, McNabb WC and McCutcheon SN. 1994b. Effects of 
condensed tannins in Lotus pedunculatus on its nutritive value for sheep. 2. 
Nitrogenous aspects. J Agricult Sci 123, 109. 
Waghorn GC, Tavendale MH and Woodfield DR. 2002. Methanogenesis from 
forages fed to New Zealand ruminants. Proceedings of the New Zealand 
Grassland Association 64: 167-171. 
Waghorn, G. 2008. Beneficial and detrimental effects of dietary condensed tannins 
for sustainable sheep and goat production - Progress and challenges. Animal 
Feed Science and Technology, vol. 147, no. 1–3, pp. 116-39. 
Waghorn, GC, Tavendale, MH and Woodfield, DR, 2002. Methanogenesis from 
forages fed to sheep. Proc .N. Z. Grassland Assoc., vol. 64, pp. 167-71. 
Wahyuni, S., Yulianti, E.S., Komara, W., Yates, N.G., Obst, J.M. and Lowry, J.B., 
1982. The performance of Ongole cattle offered either grass, sun-dried 
Leucaena leucocephala or varying proportions of each. Trop. Anim. Prod., 7: 
275-282 
Walli, .K. 2011. Biological treatment of straws. In Successes and failures with 
animal nutrition practices and technologies in developing countries, pp. 57–
61. Proceedings of the FAO electronic conference, 1-30 September 2010, 
Rome, Italy. 
Wanapat, M. 2001. Role of cassava hay as animal feed in the tropics. In: Proc. 
Intern. Workshop on “Current research and development on Use of cassava 
as Animal Feed, held in Khon Kaen Thailand, July 23-24, 2001. pp. 13 -20 
 155 
Wang Y, Douglas GB, Waghorn GC, Barry TN and Foote AG. 1996. The effect of 
condensed tannins in Lotus corniculatus upon the lactation performance in 
ewes. Journal of Agricultural Science, Cambridge 126: 353-362. 
Wang, C.J., Wang, S.P. and Zhouc, H. 2009. Influences of flavomycin, ropadiar, 
and saponin on nutrient digestibility, rumen fermentation and methane 
emission from sheep. Anim. Feed Sci. Technol. 148: 157–166. 
Watson, R. 2008. Climate Change: An environmental, development and security 
issue. Pp: 6-7. In: Proceedings of International Conference on Livestock and 
Global climate Change, 2008, Editors: P. Rowlinson, M. Steele and A. 
Nefzaoui,17-20 May, 2008, Hammamet, Tunisia Cambridge, Univesity 
press, May, 2008. 
Weiss, W.P and Wyatt, D.J. 2000. Effect of oil content and kernel processing of 
corn silage on digestibility and milk production by dairy cows. J. Dairy Sci. 
83: 351–358. 
Whitlock, L.A., Schingoethe, D.J., Hippen, A.R., Kalscheur, K.F. and 
AbuGhazaleh, A.A. 2003. Milk production and composition from cows fed 
high oilor conventional corn at two forage concentrations. J. Dairy Sci. 86: 
2428–2437. 
Wolin, MJ, Miller, TL and Stewart, CS, 1997. Microbe-microbe interactions. in P 
Hobson and C Stewart (eds), The rumen microbial ecosystem London, pp. 
469-91. 
Wood, T.A., Wallace, R.J., Rowe, A., Price, J., Yáňez-Ruiz, D.R., Murray, P. and 
Newbold, C.J. 2009. Encapsulated fumaric acid as a feed ingredient to 
decrease ruminal methane emissions. Anim. Feed Sci. Technol. 152: 62–71. 
Woodward A and Reed JD. 1989. The influence of polyphenolics on the nutritive 
value of browse: a summary of research conducted at ILCA. ILCA Bull 35, 
2. 
Woodward, S.L., Waghorn, G.C. and Thomson, N.A. 2006. Supplementing dairy 
cows with oils to improve performance and reduce methane – does it 
work? Proc. N. Z. Soc. Anim. Prod.66: 176–181. 
Yves Froehlich, Thai Van Hung. 2001. - vi.wikipedia.org/wiki/Sắn. 
Zemmelink, G., Ifar, S. and Oosting, S.J. 2003. Optimum utilization of feed 
resources: model studies and farmers’ practices in two villages in East Java, 
Indonesia. Agric. Syst. 76: 77–94. 
Zhou, Y.Y., Mao, H.L., Jiang, F., Wang, J.K., Liu, J.X. and McSweeney, C.S. 
2011a. Inhibition of rumen methanogenesis by tea saponins with reference 
 156 
to fermentation pattern and microbial communities in Hu sheep. Anim. Feed 
Sci. Technol. 166–167: 93–100. 
Zinash, S., Seyoum Bediye., Lulseged Gebrehiwot and Tadesse, T. 1995. Effect of 
harvesting stage on yield and quality of natural pasture in the central 
highlands of Ethiopia. Addis Ababa, Ethiopia. In: Proceedings of 3rd 
National Conference of the Ethiopian Society of Animal Production. 27-29 
April 1995. pp. 316-322. 
 157 
PHỤ LỤC 
Qui trình thí nghiệm sinh khí in-vitro gas production 
(Menker và Steingass, 1988) 
* Chuẩn bị mẫu 
- Nghiền mẫu đến 1mm. 
- Khối lượng mẫu cho một xilanh: 200 5 mg. Mẫu đặt vào phần cuối của 
xilanh. 
- Bôi trơn pít tông bằng vasơlin và đẩy pít tông sát đến mẫu sau đó đậy xilanh 
- Xilanh chứa mẫu phải đặt trong tủ ấm ở 38-390C qua đêm và tiếp tục để trong tủ 
ấm ở 38oC cho đến khi lấy dịch dạ cỏ và chuẩn bị xong dung dịch đệm. 
* Vị trí của xilanh 
- Xi lanh không chứa mẫu (blank) và mẫu chuẩn, cần phải đặt vào đầu, giữa và 
cuối của giá xi lanh khi thí nghiệm. 
- Mẫu nghiên cứu cần lần nhắc lại 3 lần và phải đặt tách biệt ở đầu, giữa và 
cuối của giá ống nghiệm. 
* Các dung dịch cần có 
Dung dịch khoáng đa lượng Dung dịch khoáng vi lượng 
5,7 g Na2HPO4 13,2g CaCl2 2H2O 
6,2 g KH2PO4 10 g MnCl2 4H2O 
0,6 g MgSO4 7H2O 1 g CoCl2 6H2O 
Hoà với nước cất thành 1 lit dung dịch 0,8 g FeCl2 6H2O 
 Hoà với nước cất thành 100 ml 
Dung dịch đệm 1 Dung dịch Resazurin 
35 g NaHCO3 100 mg resazurin 
4 g (NH4)HCO3 Hoà với nước cất thành 100 ml 
Hoà với nước cất thành 1 lit dung dịch 
Chuẩn bị dung dịch đệm 2 Dung dịch khử 
474 ml nước cất 2 ml NaOH 1N 
0,12 ml dung dịch khoáng vi lượng 285 mg Na2S. 7H2O 
237 ml dung dịch đệm 1 47,5 ml nước cất 
237 ml dung dịch khoáng đa lượng 
1,22 ml dung dịch resazurin 
 158 
* Dung dịch đệm 
- Từng phần của dung dịch đệm cần phải được chuẩn bị trước khi tiến hành thí 
nghiệm. 
- Chuẩn bị dung dịch đệm 2 (dung dịch tươi ngay trước khi làm thí nghiệm) 
cho mỗi lần thí nghiệm (trộn các dung dịch đã được chuẩn bị vào bình tam giác). 
* Cách pha dung dịch đệm 2 
Dung dịch Lượng dung dịch cần tạo ra (ml) 
(ml) 500 750 1000 1200 1300 1400 1500 1700 2000 
Nước cất 237,5 356 475 570 617,5 665 712,5 831 950 
DD đệm 1 120 180 240 288 312 336 360 420 480 
Đa khoáng 120 180 240 288 312 336 360 420 480 
Vi khoáng 0,06 0,090 0,12 0,144 0,156 0,168 0,180 0,210 0,240 
Resazurin 0,61 0,92 1,22 1,46 1,59 1,71 1,83 2,14 2,44 
Dung dịch 
khử 
Nước cất 23,8 35,7 47,5 57,1 61,9 66,6 71,3 83,2 95 
NaOH 1N 1,0 1,5 2,0 2,4 2,6 2,8 3,0 3,5 4,0 
Na2S.9 H2O 0,168 0,252 0,336 0,360 0,437 0,470 0,504 0,588 0,672 
Tuỳ theo số xilanh mà quyết định số lượng dung dịch đệm 2 cần pha 
Lưu ý: Dung dịch đệm 2 chỉ trộn trước khi tiến hành mỗi lần thí nghiệm 
- Làm ấm đến 38oC sau đó cho dung dịch khử vào 
- Đặt bình tam giác có dung dịch đệm vào bể nước có khuấy từ ổn định nhiệt 
39
o
C trong 25-30 phút sau đó cho dung dịch khử vào, sục khí CO2 vào dung dịch cho 
đến khi mẫu dung dịch chuyển sang màu hồng sau đó sáng. 
- pH của dung dịch nên là 7-7,3. 
* Dịch dạ cỏ 
- Dịch dạ cỏ từ 2 bò được đổ vào 1 bình, dịch phải được giữ ấm 38-390 C. 
- Lọc bỏ những hạt thức ăn lớn bằng vải xô. 
- Tỷ lệ dung dịch đệm 2: dịch dạ cỏ là: 2: 1. Dịch hỗn hợp của 2 bò với số 
lượng tương đương được trộn đều và cho vào bình tam giác với dung dịch đệm 2 
theo tỷ lệ 2:1. 
 159 
- Bình tam giác phải giữ trong bình nước ấm 38-390C, liên tục sục khí CO2 và 
khuấy đều cho đến khi đã chuẩn bị xong xilanh. pH nên: 7-7,3. 
* Chuẩn bị thí nghiệm. 
- Lấy 2 lần, mỗi lần 30 ml bằng pipet để bỏ đi nhằm đảm bảo không có không 
khí trong bề mặt xilanh. 
- Lấy 30 ml hỗn hợp dịch dạ cỏ và dung dịch đệm cho vào xilanh đã có mẫu đặt ở 
39
oC, giữ xilanh đẩy không khí ra ngoài một cách nhẹ nhàng, đặt xilanh vào tủ ấm có 
quạt đối lưu hoặc Water Bath đảm bảo nhiệt độ luôn là 3 0 C. 
- Ghi chép số ml trên xilanh ở thời điểm bắt đầu 0 giờ. 
- Ghi chép số ml khí trên xilanh ở các thời điểm thích hợp. 
- Cho khí thoát ra nếu lượng khí trong xi lanh >60 ml. 
Thời gian đọc có thể được lập kế hoạch như sau: 
Thời điểm đọc (giờ) Ngày giờ 
0 giờ sáng ngày thứ nhất 
3 12 giờ trưa ngày thứ nhất 
6 15 giờ chiều ngày thứ nhất 
12 21 giờ tối ngày thứ nhất 
24 giờ sáng ngày thứ hai 
48 giờ sáng ngày thứ ba 
72 giờ sáng ngày thứ tư 
96 giờ sáng ngày thứ năm 
Tính toán: 
1.Bmr: trung bình của mẫu trắng (blank) mỗi lần đọc. 
2.Gh: Gas sản xuất do tiêu hoá mẫu ở các thời điểm khác nhau. 
3. Ghr: Gas đọc tại các thời điểm. 
4. Ghr-1: Gas đọc tại các thời điểm trước khi xác định Ghr. 
 Gh = Ghr - Gh0r - Bmr + Ghr-1 
Sau khi loại bỏ khí khỏi xilanh thì tính toán như sau: 
5. Ghr = Gas sản xuất tại lúc đọc - Giá trị đọc sau khi loại bỏ khí lần đọc cuối cùng. 
6. Bmr: Giống như Ghr ; Gh = Ghr - Bmr + Ghr-1